BTA humain ELISA Kit pour 96T

Kit ELISA BTA humain pour 96T

À des fins de recherche uniquement
Plage d'analyse:0.5U/ml à 16U/ml
96 déterminations
 
Objectif
Ce kit permet de déterminer les concentrations de BTA dans le sérum humain, les supernats de culture cellulaire et autres fluides biologiques.
 
Principe de l'analyse
Le kit analyse le niveau de BTA humain dans l'échantillon, utilisez l'anticorps BTA humain purifié pour recouvrir les puits de la plaque de microtiter, faites un anticorps en phase solide, puis ajoutez du BTA aux puits,Anticorps BTA combinés avec HRP, devient complexe anticorps-antigène-enzyme-anticorps, après lavage complètement, ajouter TMB solution de substrat, TMB substrat devient de couleur bleue à HRP enzyme-catalysé,La réaction est terminée par l'ajout d'une solution d'acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nmLa concentration de BTA humain dans les échantillons est ensuite déterminée en comparant la surdose de
les échantillons à la courbe standard.
 
Matériaux fournis avec le kit

                                                                                                             
Exigences relatives aux échantillons
1L'extraction doit être effectuée le plus rapidement possible après la collecte des spécimens, et conformément à la littérature pertinente, et l'expérience doit être effectuée le plus rapidement possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.
2- Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'HRP actif.
 
Procédure d'évaluation
Diluer et ajouter l'échantillon:Diluer Densité initiale Norme comme indiqué dans le tableau suivant:

 
2. Ajouter l'échantillon: placer les puits vides séparément (les puits de comparaison vides n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).ajouter 40 μl de dilution de l'échantillon au puits d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon aux puits, ne pas toucher la paroi du puits autant que possible, et mélanger doucement.
3Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.
4. Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.
5. Laver: découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, encore pendant 30s puis drainer, répéter 5 fois, sécher par tapotement.
6. Ajouter une enzyme: ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, sauf puits vierge.
7- Incubez: opération avec 3.
8- Le lavage: opération avec 5.
9. Couleur: ajouter à chaque puits la solution de chromogène A 50ul et la solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation de la lumière pendant 10 min à 37°C
10Arrêtez la réaction: Ajoutez Stop Solution50μl à chaque puits, Arrêtez la réaction ((la couleur bleue
changement de couleur au jaune).
11. Analyse: prenez le puits vide à zéro, lisez l'absorbance à 450 nm après l'ajout de la solution d'arrêt et dans les 15 min.
 
Calculer
Prenez la densité standard comme horizontale, la valeur OD pour la verticale, dessinez la courbe standard sur du papier graphique,Déterminez la densité correspondante selon la valeur OD de l'échantillon par la courbe de l'échantillon, multiplié par le multiple de dilution, ou calculer l'équation de régression linéaire de la courbe standard avec la densité standard et la valeur OD,avec la valeur OD de l'échantillon dans l'équation,calculer la densité de l'échantillon, multiplié par le facteur de dilution, on obtient la densité réelle de l'échantillon.
Notes importantes
1Le kit doit être retiré de l'environnement réfrigérateur et équilibré pendant 15 à 30 minutes à température ambiante, les plaques ELISA recouvertes si elles ne sont pas usées après ouverture.la plaque doit être conservée dans un sac scellé.
2. le tampon de lavage va séparation cristallisation, il peut être chauffé l'eau aide à se dissoudre lorsque dilué. le lavage n'affecte pas le résultat.
3. ajouter l'échantillon avec un échantillonneur à chaque étape, et de relire sa précision fréquemment, éviter l'erreur expérimentale. ajouter l'échantillon dans les 5 min, si le nombre d'échantillons est beaucoup, recommandons d'utiliser Volley.
4. si la teneur en matière d'essai est excessivement élevée (la DO de l'échantillon est supérieure au premier puits standard ), veuillez diluer l'échantillon (n fois), veuillez diluer et multiplier par le facteur de dilution.(×n×5).
5La membrane de la plaque de fermeture limite uniquement l'utilisation jetable, afin d'éviter la contamination croisée.
6Le substrat évite la conservation de la lumière..
7Veuillez respecter strictement les instructions d'utilisation, la détermination des résultats de l'essai doit prendre le lecteur de plaque de microtiter comme norme.
8. Tous les échantillons, le tampon de lavage et chaque type de rejet doivent être selon le procédé du matériau infectieux.
9Ne mélangez pas les réactifs avec ceux d'autres lots.
Conservation et durée de validité
1. Conservation à 2 à 8°C.
2.Période de validité: six mois