BTA humain ELISA Kit pour 96T

BTA humain ELISA Kit pour 96T

POUR L'USAGE DE RECHERCHES SEULEMENT
Chaîne d'analyse : 0.5U/ml - 16U/ml
96 déterminations
 
But
Ce kit tient compte de la détermination des concentrations de BTA en sérum humain, surnageants de culture cellulaire et d'autres fluides biologiques
 
Principe de l'analyse
Le niveau humain de l'analyse BTA de kit dans l'échantillon, utilisation a purifié l'anticorps humain de BTA pour enduire des puits de plat de microtitre, préparent l'anticorps en phase solide, ajoutent alors BTA aux puits, l'anticorps combiné de BTA qui avec HRP a marqué, anticorps devenu - antigène - complexe d'enzyme-anticorps, après avoir lavé complètement, ajoutent la solution de substrat de TMB, le substrat de TMB devient couleur bleue à HRP enzyme-catalysé, la réaction est terminée par l'addition d'une solution acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nanomètre. La concentration de BTA humain dans les échantillons est alors déterminée en comparant l'O.D. du
échantillons à la courbe standard.
 
Matériaux équipés de kit

                                                                                                             
Conditions de spécimen
1. extrayez dès que possible après collection de spécimen, et selon le 2literature approprié, et devriez être expérience dès que possible après l'extraction. Si elle ne peut pas, le spécimen peut être maintenu dans le ℃ -20 pour préserver, Avoid a répété les cycles gel-dégel.
2.Can ne pas détecter l'échantillon qui contiennent NaN3, parce que NaN3 empêche HRP actif.
 
Procédure d'analyse
Diluez et ajoutez l'échantillon : Norme originale diluée de densité en tant que suivent table :

 
2. ajoutez l'échantillon : Puits vides réglés séparément (les puits vides de comparaison n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif de HRP-conjugué, l'autre chaque opération d'étape est même). échantillon de essai bien. ajoutez la dilution 40μl d'échantillon à l'échantillon de essai bien, puis ajoutez l'échantillon de essai 10μl (la dilution finale d'échantillon est 5 fois), ajoutez l'échantillon aux puits, ne touchez pas le mur bon aussi loin que possible, et doucement le mélange.
3. incubez : Après fermeture du plat avec la membrane de plat de fermeture, incubez pour la minute 30 à 37℃.
4. liquide de Configurate : la solution de lavage de 30 fois (ou fois 20) a dilué fois 30 le fois (ou 20) avec de l'eau distillée et la réservation.
5. lavage : Découvrez la membrane de plat de fermeture, liquide d'écart, sec par l'oscillation, ajoutez le tampon de lavage à chaque puits, toujours pour puis le drain 30s, répétez 5 fois, sèches par le brevet.
6. ajoutez l'enzyme : Ajoutez le réactif 50μl de HRP-conjugué à chaque puits, excepté le puits vide.
7. incubez : Opération avec 3.
8. lavage : Opération avec 5.
9. couleur : Ajoutez la solution de chromogène un 50ul et la solution de chromogène B 50ul à chaque puits, éludent la conservation légère pour la minute 10 à 37℃
10. arrêt la réaction : Ajoutez l'arrêt Solution50μl à chaque puits, arrêtez la réaction (la couleur bleue
changement pour jaunir la couleur).
11. analyse : prenez le blanc bien en tant qu'absorbance nulle et lue à 450nm après avoir ajouté la solution d'arrêt et dans 15min.
 
Calculez
Prenez la densité standard en tant qu'horizontal, la valeur d'OD pour la verticale, dessinez la courbe standard sur le papier de graphique, découvrez la densité correspondante selon la valeur de l'échantillon OD par la courbe témoin, multipliée par le multiple de dilution, ou calculez l'équation de régression de ligne droite de la courbe standard avec la densité standard et la valeur d'OD, avec la valeur de l'échantillon OD dans l'équation, calculent la densité d'échantillon, multipliée par le facteur de dilution, le résultat est la densité réelle d'échantillon.
Notes importantes
1. Le kit sort de l'environnement de réfrigération devrait être équilibré 15-30 minutes dans la température ambiante, plats d'ELISA enduits si a pour ne pas employer après ouvert, le plat devrait être stocké dans le sac scellé.
2. séparation de lavage de cristallisation de volonté de tampon, ce peut être chauffé les aides de l'eau se dissolvent si dilué. Le lavage n'affecte pas le résultat.
3. ajoutez l'échantillon avec l'échantillonneur chaque étape, et corrigez sur épreuves son exactitude fréquemment, évite l'erreur expérimentale. ajoutez l'échantillon à moins de 5 que la minute, si le nombre d'échantillon est beaucoup, recommandent d'employer la volée.
4. si le contenu matériel de essai est excessivement plus élevé (l'échantillon OD est plus grand que le premier puits standard), svp échantillon dilué (n-pli), svp diluente et multiplié par le facteur de dilution. (×n×5).
5. la membrane de plat de fermeture limite seulement l'utilisation jetable, d'éviter la contamination transversale.
6. Le substrat éludent la conservation légère.
7. Veuillez selon l'instruction d'utilisation strictement, la détermination de résultat d'essai doit prendre le lecteur de plat de microtitre comme norme.
8. Tout l'échantillons, tampon de lavage et chaque genre de rejet devraient selon le processus matériel contagieux.
9. Ne mélangez pas les réactifs à ceux d'autres sorts.
Stockage et validité
1.Storage : 2-8℃.
2.validity : six mois
 
 

Rebecca Yan