Feuille non coupée d'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM WB/S/P (cassette/bande)

Feuille non coupée d'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM WB/S/P (cassette/bande)

UTILISATION PRÉVUE

L'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM est un immunoessai chromatographique d'écoulement latéral pour la détection qualitative du l'anti-chikungunya virus d'IgG et d'IgM (CHIK) dans le sang total, le sérum ou le plasma humain. On le prévoit pour être employé comme test de dépistage et comme aide dans le diagnostic de l'infection avec CHIK. N'importe quel spécimen réactif avec l'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM doit être confirmé avec des méthodes d'essai alternatives et des résultats cliniques.

RÉSUMÉ ET EXPLICATION DE L'ESSAI

Chikungunya est un viral infection rare transmis par la morsure d'un moustique infecté d'aegypti d'aedes. Il est caractérisé par une éruption, une fièvre, et des douleurs articulaires graves (arthralgies) qui durent habituellement pendant trois à sept jours. Le nom est dérivé de la signification de mot de Makonde « cela qui se replie vers le haut » en référence à la posture penchée développée en raison des symptômes arthritiques de la maladie. Il se produit pendant la saison des pluies dans des secteurs tropicaux du monde, principalement en Afrique, Asie du Sud-Est, en Inde du sud et Pakistan1-2.

Les symptômes sont le plus souvent médicalement forme imperceptible que ceux ont observée dans la fièvre dengue. En effet, la double infection de la dengue et le chikungunya a été rapportée dans India3. À la différence de la dengue, les manifestations hémorragiques sont relativement rares et le plus souvent la maladie est un individu limitant la maladie fébrile. Par conséquent il est très important de distinguer médicalement la dengue de l'infection de CHIK.

CHIK est diagnostiqué basé sur l'analyse sérologique et l'isolement viral chez les souris ou la culture de tissu. Un immunoessai d'IgM est l'essai en laboratoire le plus pratique method4.

L'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM utilise les antigènes de recombinaison dérivés de sa structure protein5, il détecte l'anti-CHIK sérum ou plasma d'hospitalisé d'IgM d'ici 15 minutes. L'essai peut être réalisé par le personnel non formé ou d'une façon minimum qualifié, sans équipement de laboratoire encombrant.

PRINCIPE D'ESSAI

L'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM est un immunoessai chromatographique d'écoulement latéral basé sur le principe de l'analyse de capture d'IgM. La cassette d'essai se compose : 1) une protection conjuguée colorée par Bourgogne contenant des antigènes de CHIK conjugués avec de l'or colloïdal (CHIK conjugue) et des conjugués d'IgG-or de lapin, 2) bande de membrane de nitrocellulose d'a contenant une bande d'essai (bande de T1 ou de T2) et une bande de contrôle (bande de C). La bande de T est enduite d'un préenduisage avec de l'anticorps anti-humain de M, et la bande de C est enduite d'un préenduisage avec l'anti-lapin IgG de chèvre.

Quand à volume approprié de spécimen d'essai est distribué dans l'échantillon bien de la cassette, le spécimen émigre par l'action capillaire à travers la cassette. L'anticorps d'IgM à CHIK, si le présent dans le spécimen liera aux conjugués de CHIK. L'immunocomplex est alors capturé sur la membrane par l'anticorps anti-humain enduit d'un préenduisage d'IgM, formant un Bourgogne a coloré la bande de T, indiquant un résultat d'essai positif de CHIK IgM.

L'absence de la bande de T suggère un résultat négatif. L'essai contient un contrôle interne (bande de C) qui devrait montrer un Bourgogne a coloré la bande de l'immunocomplex du conjugué d'IgG-or d'IgG /rabbit d'anti-lapin de chèvre indépendamment du développement de couleur sur la bande de T. Autrement, le résultat d'essai est invalide et le spécimen doit être retesté avec un autre dispositif.

COMPOSANTS DE KIT

MATÉRIAUX REQUIS MAIS NON FOURNIS

AVERTISSEMENTS ET PRÉCAUTIONS

• Pour l'usage diagnostique in vitro professionnel seulement.

• N'employez pas après que la date d'échéance ait indiqué sur le paquet. N'employez pas l'essai si sa poche d'aluminium est endommagée. Ne réutilisez pas les essais.

• Ce kit contient des produits d'origine animale. La connaissance certifiée d'origine et/ou de l'état sanitaire des animaux ne garantit pas totalement l'absence des agents pathogènes transmissibles. Elle est, a recommandé donc que ces produits soient traités comme potentiellement infectieux, et manipulés en observant les mesures de sécurité habituelles (n'ingérez pas ou n'inhalez pas).

• Évitez la contamination transversale des spécimens à l'aide d'un nouveau conteneur de collection de spécimen pour chaque spécimen obtenu.

• Lisez la procédure entière soigneusement avant de réaliser tous les essais.

• Ne mangez pas, ne buvez pas ou ne fumez pas dans le secteur où les spécimens et les kits sont manipulés. Manipulez tous les spécimens comme si ils contiennent des agents infectieux. Observe a établi des précautions contre des risques microbiologiques dans toute la procédure et suit les procédures standard pour la disposition appropriée des spécimens. Portez les vêtements de protection tels que des manteaux de laboratoire, des gants jetables et la protection oculaire quand on analyse des spécimens.

• Salin protégé contient l'azoture de sodium qui peut réagir avec l'avance ou la tuyauterie de cuivre pour former les azotures potentiellement explosifs en métal. En se débarrassant des échantillons salins ou extraits protégés, toujours flux avec des quantités copieuses de l'eau pour empêcher l'accumulation d'azoture.

• N'échangez pas ou ne mélangez pas les réactifs de différents sorts.

• L'humidité et la température peuvent compromettre des résultats.

• Les matériaux de essai utilisés devraient être jetés selon local, l'état et/ou les règlements fédéraux.

   

  STOCKAGE ET STABILITÉ

  Magasin en tant qu'emballé dans la poche scellée à la température ambiante ou frigorifié (2-30°C). Le dispositif d'essai est stable par la date d'échéance imprimée sur la poche scellée. Le dispositif d'essai doit demeurer dans la poche scellée jusqu'à l'utilisation. Ne gelez pas. N'employez pas au delà de la date d'échéance.

   

  COLLECTION DE SPÉCIMEN ET PREPARETION

• Le dispositif rapide d'essai de Chikungunya IgG/IgM (sang total/sérum/plasma) peut être exécuté utilisant le sang total (du venipuncture ou du fingerstick), le sérum ou le plasma.

• Sérum ou plasma distinct du sang dès que possible pour éviter le hemolysis. Employez seulement les spécimens clairs et non-hemolyzed.

• L'essai devrait être réalisé juste après la collection de spécimen. Ne laissez pas les spécimens à la température ambiante pendant des périodes prolongées. Des spécimens de sérum et de plasma peuvent être stockés à 2-8°C pendant jusqu'à 3 jours. Pour l'entreposage à long terme, des spécimens devraient être gardés au-dessous du sang total de -20°C. rassemblé par venipuncture devraient être stockés à 2-8°C si l'essai doit être couru d'ici 2 jours de la collection. Ne gelez pas les spécimens de sang total.

• Apportez les spécimens à la température ambiante avant d'examiner. Des spécimens gelés doivent être complètement dégelés et mélangés bien avant d'examiner. Des spécimens ne devraient pas être gelés et dégelés à plusieurs reprises.

• Si des spécimens doivent être embarqués, ils devraient être emballés conformément aux règlements locaux couvrant le transport des agents étiologiques.

   

  PROCÉDURE D'ANALYSE

  Permettez au dispositif, au spécimen, au tampon et/ou aux contrôles d'essai d'atteindre la température ambiante (15 ‑ 30°C) avant d'examiner.

  1.Bring la poche à la température ambiante avant de l'ouvrir. Enlevez le dispositif d'essai de la poche scellée et employez-le dès que possible.

  2.Place le dispositif d'essai sur une surface propre et de niveau. Tenez le compte-gouttes verticalement et transférer 2 gouttes de sang total (µL approximativement 80) ou 1 goutte de plasma/de sérum (µL approximativement 40) au spécimen bien (s) du dispositif d'essai, puis ajoutez 2 gouttes de tampon et commencer la minuterie.

  3.Wait pour que les discriminations raciales apparaissent. Résultats lus à 10 minutes. N'interprétez pas les résultats après 20 minutes.

   

  INTERPRÉTATION DE RÉSULTAT D'ANALYSE

   

   

RÉSULTAT POSITIF :

Positif d'IgM : * la discrimination raciale dans la ligne de contrôle la région (c) apparaît et une discrimination raciale apparaît dans la ligne la région 1 (T1) d'essai. Le résultat est positif pour les anticorps spécifiques-IgM de Chikungunya et est indicatif de l'infection primaire de Chikungunya.

Positif d'IgG : * la discrimination raciale dans la ligne de contrôle la région (c) apparaît et une discrimination raciale apparaît dans la ligne la région 2 (T2) d'essai. Le résultat est positif pour le virus de Chikungunya spécifique-IgG et est probablement indicatif de l'infection secondaire de Chikungunya.

Positif d'IgG et d'IgM : * la discrimination raciale dans la ligne de contrôle la région (c) apparaît et deux discriminations raciales devraient apparaître dans la ligne les régions 1 et 2 d'essai (T1 et T2). Les intensités de couleur des lignes ne doivent pas s'assortir. Le résultat est positif pour des anticorps d'IgG et d'IgM et est indicatif de l'infection secondaire de Chikungunya.

*NOTE : L'intensité de la couleur dans la ligne région d'essai (T1 et/ou T2) variera selon la concentration des anticorps de Chikungunya dans le spécimen. Par conséquent, n'importe quelle nuance de couleur dans la ligne région d'essai (T1 et/ou T2) devrait être considérée positive.

RÉSULTAT NÉGATIF :

La discrimination raciale dans la ligne de contrôle la région (c) apparaît. Aucune ligne n'apparaît dans la ligne les régions 1 ou 2 d'essai (T1 ou T2).

RÉSULTAT INVALIDE :

La ligne de contrôle (c) tombe pour apparaître. Le volume de tampon insuffisant ou les techniques procédurales incorrectes sont les raisons le plus susceptibles de la ligne échec de contrôle. Examinez la procédure et répétez la procédure avec un nouveau dispositif d'essai. Si le problème persiste, cessez d'employer le kit d'essai immédiatement et entrez en contact avec votre distributeur local.

Note :

1. L'aspect de n'importe quelle couleur de Bourgogne dans la bande de T, indépendamment de l'intensité, doit être considéré comme présence de la bande.

2. Des échantillons avec des résultats positifs devraient être confirmés avec des méthodes d'essai alternatives et des résultats cliniques avant une détermination positive est faits.

CONTRÔLE DE QUALITÉ

Utilisant l'essai rapide individuel de Chikungunya IgG/IgM dispositif a aussi décrit dans la procédure ci-dessus d'analyse, couru 1 contrôle positif et 1 contrôle de négatif (fourni sur demande) dans les circonstances suivantes pour surveiller la représentation d'essai :

1. Un nouvel opérateur emploie le kit, avant l'essai de exécution des spécimens.

2. Un nouveau kit d'essai est employé.

3. Une nouvelle expédition des kits est employée.

4. La température a employé pendant le stockage des chutes de kit en dehors de 2°C -30°C.

5. La température de la zone d'essai tombe en dehors de 15°C-30°C.

    

   CARACTÉRISTIQUE DE FONCTIONNEMENT

   1. comparaison du dispositif rapide d'essai de Chikungunya IgG/IgM avec MAC-ELISA

   Une étude d'évaluation a été effectuée chez Unite de virologie, DES Armees, Ministere De la Defense, France d'Institute de Medecine Tropicale De Service de Sante.

   Le panneau de spécimen d'évaluation s'est composé de 72 spécimens récemment infectés diagnostiqués par MAC-ELISA et de 21 spécimens contenant 10 de l'autre infection d'arbovirus, 3 de l'infection de nyong d'O'Nyong, et négatif 8 pour tous les essais. Les données d'évaluation sont montrées dans la table suivante.

Sensibilité relative : 90,3%, spécificité relative : 100%, accord global : 92,4%

LIMITATIONS D'ESSAI

la procédure d'analyse 1.The et l'interprétation de résultat d'analyse doivent être suivies de près en examinant la présence d'IgM anti-CHIK dans le sérum ou le plasma de différents sujets. Le manque de suivre la procédure peut donner des résultats inexacts.

l'essai rapide de 2.The Chikungunya IgG/IgM est limité à la détection qualitative d'IgM anti-CHIK dans le sérum ou le plasma humain. L'intensité de la bande d'essai n'a pas la corrélation linéaire avec le titre d'anticorps dans le spécimen.

le résultat 3.A négatif pour un sujet individuel indique l'absence d'IgM décelable anti-CHIK. Cependant, un résultat d'essai négatif n'exclut pas la possibilité d'exposition à ou d'infection avec CHIK

le résultat 4.A négatif peut se produire si la quantité d'anti-CHIK présent d'IgM dans le spécimen est au-dessous des limites de détection de l'analyse, ou les anticorps qui sont détectés ne sont pas présents pendant l'étape de la maladie en laquelle un échantillon est rassemblé.

les spécimens 5.Some contenant le titre exceptionnellement élevé des anticorps heterophile ou le facteur rhumatoïde peuvent affecter des résultats prévus.

les résultats 6.The obtenus avec cet essai devraient seulement être interprétés en même temps que d'autres procédures de diagnostic et résultats cliniques.

RÉFÉRENCES

1.Shah kilovolt, JR de Gibbs CJ, enquête de Banerjee G. Virological de l'épidémie de la fièvre hémorragique à Calcutta : isolement de trois tensions de virus de Chikungunya. Indien J Med Res 1964 ; 52 : 676-83.

2.Powers AM, C.A. de Brault, RB de Tesh, réapparition de Sc de tisserand des virus de Chikungunya et d'O'nyong-nyong : preuves pour des lignées géographiques distinctes et des relations évolutionnaires éloignées. J Gen Virol 2000 ; 81:471-9

RM 3.Myers et Carey De. Isolement concourant dans le patient de deux arbovirus, Chikungunya et types de dengue - 2. La Science 1967 ; 157:1307-8.

4. Thein S, La Linn M, Aaskov J, Aung millimètre, oui M, Zaw A, Myint A.Development d'une analyse enzyme-liée indirecte simple d'immunosorbant pour la détection de l'anticorps de l'immunoglobuline M en sérum des patients après une manifestation d'infection de virus de chikungunya à Yangon, Myanmar. Transport R Soc Trop Med Hyg. 1992 86:438-42.

5. Yamamoto K, Hashimoto K, protéines structurelles d'Ogata T du virus de Chikungunya. Simizu B, J Virol. 1984 juillet ; 51(1) : 254-8