Feuille non coupée d'essai rapide de Chikungunya IgG/IgM WB/S/P (cassette/bande)

Chikungunya IgG/IgM WB/S/P Test rapide en feuille non coupée (en cassette ou en bande)

Utilisation prévue

Le test rapide IgG/IgM de Chikungunya est un immuno-essai chromatographique à flux latéral pour la détection qualitative du virus anti-chikungunya IgG et IgM (CHIK) dans le sang humain entier, le sérum ou le plasma.Il est destiné à être utilisé comme test de dépistage et comme aide au diagnostic de l'infection par CHIK.Tout échantillon réactif avec le test rapide de Chikungunya IgG/IgM doit être confirmé par des méthodes de test alternatives et des résultats cliniques.

Résumé et explication du test

Le chikungunya est une infection virale rare transmise par la piqûre d'un moustique Aedes aegypti infecté.et douleurs articulaires sévères (arthralgies) qui durent généralement de trois à sept joursLe nom est dérivé du mot makonde qui signifie "ce qui se penche" en référence à la posture courbée développée à la suite des symptômes arthritiques de la maladie.Il se produit pendant la saison des pluies dans les régions tropicales du monde., principalement en Afrique, en Asie du Sud-Est, dans le sud de l'Inde et au Pakistan1-2.

Les symptômes sont le plus souvent cliniquement indistinguibles de ceux observés dans la fièvre de dengue.les manifestations hémorragiques sont relativement rares et le plus souvent la maladie est une maladie fébrile auto-limitéeIl est donc très important de distinguer cliniquement la dengue de l'infection par le CHIK.

Le CHIK est diagnostiqué sur la base de l'analyse sérologique et de l'isolement viral chez la souris ou une culture tissulaire.

Le test rapide de Chikungunya IgG/IgM utilise des antigènes recombinants dérivés de sa structure protéique5, il détecte les IgM anti-CHIK dans le sérum ou le plasma du patient en 15 minutes.L'essai peut être effectué par du personnel non formé ou peu qualifié., sans équipement de laboratoire encombrant.

Principe de l'essai

Le test rapide de Chikungunya IgG/IgM est un immunoassay chromatographique à flux latéral basé sur le principe de l'assay de capture d'IgM. La cassette de test est composée:1) un tampon conjugué de couleur bourgogne contenant des antigènes CHIK conjugués avec de l'or colloïde (conjugués CHIK) et des conjugués IgG-or de lapin, 2) une bande de membrane de nitrocellulose contenant une bande d'essai (bande T1 ou T2) et une bande de contrôle (bande C).et la bande C est pré-enduite d'IgG anti-lapin de chèvre.

Lorsque l'échantillon est distribué en quantité suffisante dans le puits d'échantillonnage de la cassette, l'échantillon migre par action capillaire à travers la cassette.s'il est présent dans l'échantillon, se liera aux conjugués CHIKLe complexe immunitaire est ensuite capturé sur la membrane par l' anticorps IgM anti-humain pré-enduit.y, formant une bande T de couleur bourgogne, indiquant un résultat de test CHIK IgM positif.

L'absence de bande T suggère un résultat négatif. Le test contient un témoin interne (bande C) qui devrait présenter une bande de couleur bourgogne du complexe immunitaire de l'IgG anti-lapin de chèvre/le conjugué IgG-or du lapin, quel que soit le développement de la couleur sur la bande T. Sinon, le résultat de l'essai est invalide et l'échantillon doit être réexaminé avec un autre dispositif.

Components du kit

Matériaux requis mais non fournis

Avertissements et précautions

• Pour les professionnelsen vitroà usage diagnostique uniquement.

• Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l'emballage.

• La connaissance certifiée de l'origine et/ou de l'état sanitaire des animaux ne garantit pas totalement l'absence d'agents pathogènes transmissibles.C'est donc, il est recommandé de traiter ces produits comme potentiellement infectieux et de les manipuler en respectant les précautions de sécurité habituelles (ne pas ingérer ni inhaler).

• Évitez la contamination croisée des échantillons en utilisant un nouveau récipient de prélèvement pour chaque échantillon obtenu.

• Lisez attentivement toute la procédure avant d'effectuer des tests.

• Ne mangez pas, ne buvez pas et ne fumez pas dans la zone où les échantillons et les kits sont manipulés.Observer les précautions établies contre les dangers microbiologiques tout au long de la procédure et suivre les procédures standard pour l'élimination correcte des échantillons. Portez des vêtements de protection tels que des manteaux de laboratoire, des gants jetables et une protection pour les yeux lorsque les échantillons sont analysés.

• La solution saline tamponnée contient de l'azide de sodium qui peut réagir avec du plomb ou du cuivre pour former des azides métalliques potentiellement explosifs.toujours rincer avec beaucoup d'eau pour éviter l'accumulation d'azide.

• Ne mélangez ni n'échangez pas de réactifs provenant de lots différents.

• L'humidité et la température peuvent nuire aux résultats.

• Les matériaux d'essai utilisés doivent être éliminés conformément aux réglementations locales, étatiques et/ou fédérales.

   

  Réservation et stabilité

  Conserver tel qu' il est emballé dans le sac scellé à température ambiante ou réfrigéré (2-30°C).Le dispositif d'essai doit rester dans le sac scellé jusqu'à son utilisation.Ne pas congeler, ne pas utiliser après la date de péremption.

   

  RECOLLECTION et préparation des échantillons

• L'appareil de test rapide de Chikungunya IgG/IgM (sang entier/ sérum/ plasma) peut être réalisé à l'aide de sang entier (provenant d'une ponction veineuse ou d'une piqûre de doigt), de sérum ou de plasma.

• Séparer le sérum ou le plasma du sang dès que possible pour éviter l' hémolyse.

• Ne laissez pas les échantillons à température ambiante pendant de longues périodes.Les échantillons de sérum et de plasma peuvent être conservés à 2 à 8°C jusqu'à 3 jours.Pour un stockage à long terme, les échantillons doivent être conservés à une température inférieure à -20°C. Le sang entier prélevé par ponction veineuse doit être conservé à une température comprise entre 2°C et 8°C si l'essai doit être effectué dans les 2 jours suivant la collecte.Ne congelez pas les échantillons de sang entier.

• Les échantillons congelés doivent être complètement décongelés et bien mélangés avant l'essai; ils ne doivent pas être congelés et décongelés à plusieurs reprises.

• Si les spécimens doivent être expédiés, ils doivent être emballés conformément aux réglementations locales relatives au transport des agents étiologiques.

   

  Procédure d'évaluation

  Laissez le dispositif d'essai, l'échantillon, le tampon et/ou les contrôles atteindre la température ambiante (15-30°C) avant l'essai.

  1Avant de l' ouvrir, ramener le sachet à température ambiante, retirer le dispositif d'essai du sachet scellé et l' utiliser dès que possible.

  2Placez le dispositif d'essai sur une surface propre et plane.2 gouttes de sang entier(environ 80 μL) ou1 goutte de plasma ou de sérum(environ 40 μL) dans le puits de l'échantillon (S) du dispositif d'essai, puis ajouter2 gouttes de tamponet démarre la minuterie.

  3Attendez que les lignes colorées apparaissent.Lisez les résultats à 10 minutes.Ne pas interpréter les résultats après 20 minutes.

   

  Interprétation du résultat de l'essai

   

   

Résultat positif:

IgM positif:* La ligne colorée apparaît dans la région de la ligne de contrôle (C) et une ligne colorée apparaît dans la région de la ligne d'essai 1 (T1).Le résultat est positif pour les anticorps IgM spécifiques au Chikungunya et indique une infection primaire par le Chikungunya..

IgG positif:* La ligne colorée apparaît dans la région de la ligne de contrôle (C) et une ligne colorée apparaît dans la région de la ligne d'essai 2 (T2).Le résultat est positif pour l' IgG spécifique au virus du chikungunya et est probablement indicatif d' une infection secondaire par le chikungunya..

IgG et IgM positifs:* La ligne colorée apparaît dans la région de la ligne de contrôle (C) et deux lignes colorées devraient apparaître dans les régions de la ligne d'essai 1 et 2 (T1 et T2).Les intensités de couleur des lignes ne doivent pas correspondreLe résultat est positif pour les anticorps IgG et IgM et indique une infection secondaire par le chikungunya.

*NOTE:L'intensité de la couleur dans la région des lignes d'essai (T1 et/ou T2) varie en fonction de la concentration des anticorps du Chikungunya dans l'échantillon.Toute nuance de couleur dans la région des lignes d'essai (T1 et/ou T2) doit être considérée comme positive..

Résultat négatif:

La ligne de couleur apparaît dans la région de la ligne de contrôle (C), aucune ligne n'apparaît dans les régions de la ligne d'essai 1 ou 2 (T1 ou T2).

Résultat non valide:

Le volume de tampon insuffisant ou des techniques procédurales incorrectes sont les raisons les plus probables d'une défaillance de la ligne de contrôle.Revoir la procédure et répéter la procédure avec un nouveau dispositif d'essaiSi le problème persiste, cessez immédiatement d' utiliser le kit de test et contactez votre distributeur local.

Nom de l'organisme:

1L'apparition d'une couleur bordeaux dans la bande T, quelle que soit son intensité, doit être considérée comme la présence de la bande.

2. Les échantillons dont les résultats sont positifs doivent être confirmés par des méthodes de test alternatives et des résultats cliniques avant qu'une détermination positive ne soit faite.

Contrôle de la qualité

En utilisant un dispositif de test rapide individuel de Chikungunya IgG/IgM tel que décrit dans la procédure d'analyse ci-dessus,exécuter 1 contrôle positif et 1 contrôle négatif (fourni sur demande) dans les circonstances suivantes pour surveiller les performances de l'essai::

1. Un nouvel opérateur utilise le kit avant d'effectuer des essais sur des spécimens.

2. Un nouveau kit de test est utilisé.

3. Un nouveau lot de kits est utilisé.

4. La température utilisée pendant le stockage du kit ne doit pas dépasser 2°C -30°C.

5. La température de la zone d'essai ne doit pas dépasser 15°C à 30°C.

    

   Caractéristique des performances

   1.Comparaison du dispositif de test rapide IgG/IgM du chikungunya avec le MAC-ELISA

   Une étude d'évaluation a été réalisée à l'Institut de médecine tropicale de service de santé des armées, Ministère de la Défense, France.

   Le panel d'échantillons d'évaluation était composé de 72 échantillons récemment infectés diagnostiqués par MAC-ELISA et de 21 échantillons contenant 10 d'autres arbovirus, 3 d'O ̊Nyong nyong,et 8 négatifs pour tous les testsLes données d'évaluation sont présentées dans le tableau suivant.

Sensibilité relative: 90,3%, spécificité relative: 100%, accord général: 92,4%

Limites de l'essai

1.La procédure d'analyse et l'interprétation des résultats doivent être suivies de près lors de l'analyse de la présence d'anti-CHIK IgM dans le sérum ou le plasma de sujets individuels.Le non-respect de la procédure peut donner des résultats inexacts.

2Le test rapide IgG/IgM de Chikungunya est limité à la détection qualitative de l'anti-CHIK IgM dans le sérum ou le plasma humain.L'intensité de la bande d'essai n'a pas une corrélation linéaire avec le titre d'anticorps de l'échantillon..

3.Un résultat négatif pour un individu indique l'absence d'anti-CHIK IgM détectable.

4.Un résultat négatif peut se produire si la quantité d'IgM anti-CHIK présente dans l'échantillon est inférieure aux limites de détection de l'analyse,ou les anticorps détectés ne sont pas présents au stade de la maladie au cours duquel un échantillon est prélevé.

5.Certains échantillons contenant un titre anormalement élevé d'anticorps hétérophiles ou de facteur rhumatoïde peuvent affecter les résultats attendus.

6.Les résultats obtenus par ce test ne doivent être interprétés qu'en conjonction avec d'autres procédures diagnostiques et résultats cliniques.