Capacité antioxydante totale humaine (TAOC) Elisa Kit pour 96T

Capacité antioxydante humaine totale

Plage d'analyse:0.5 U/ml 12,5 U/ml

À des fins de recherche uniquement, non à des fins de diagnostic.

Objectif

Ce kit permet de déterminer les concentrations de COTA dans le sérum humain, les supernats de culture cellulaire et autres fluides biologiques.

Principe de l'analyse

Le kit analyse le niveau de TAOC humain dans l'échantillon, utilisez l'anticorps TAOC humain purifié pour recouvrir les puits de la plaque de microtiter, faites des anticorps en phase solide, puis ajoutez TAOC aux puits,Anticorps TAOC combinés avec HRP, devient complexe anticorps-antigène-enzyme-anticorps, après lavage complètement, ajouter TMB solution de substrat, TMB substrat devient de couleur bleue à HRP enzyme-catalysé,La réaction est terminée par l'ajout d'une solution d'acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nm.

La concentration de TAOC humain dans les échantillons est ensuite déterminée en comparant l'O.D. des échantillons à la courbe standard.

Matériauxfourni avec le kit

Exigences relatives aux échantillons

1. extraire le plus tôt possible après la collecte des spécimens et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté le plus tôt possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.

2. Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité du HRP.

Procédure d'évaluation

1.Diluer et ajouter l'échantillon:Diluer Densité initiale Norme comme indiqué dans le tableau suivant:

2. Ajouter l'échantillon: placer les puits vides séparément (les puits de comparaison vides n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).ajouter 40 μl de dilution de l'échantillon au puits d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon aux puits, ne pas toucher la paroi du puits autant que possible, et mélanger doucement.

3Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.

4. Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.

5. Laver: découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, encore pendant 30s puis drainer, répéter 5 fois, sécher par tapotement.

6. Ajouter une enzyme: ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, sauf puits vierge.

7- Incubez: opération avec 3.

8- Le lavage: opération avec 5.

9. Couleur: ajouter à chaque puits la solution de chromogène A 50ul et la solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation de la lumière pendant 10 min à 37°C

10Arrêtez la réaction: Ajoutez Stop Solution50μl à chaque puits, Arrêtez la réaction ((la couleur bleue change de couleur jaune).

11. Analyse: prenez le puits vide à zéro, lisez l'absorbance à 450 nm après l'ajout de la solution d'arrêt et dans les 15 min.