Essai rapide en une étape de Chagas IgG/IgM

Essai rapide en une étape de Chagas IgG/IgM

SPÉCIMEN : Plasma entier de sérum sanguin

UTILISATION PRÉVUE

L'essai rapide de Chagas IgG/IgM est un immunoessai chromatographique d'écoulement latéral pour la détection qualitative du l'anti-Trypanosoma cruzi d'IgG (cruzi de T.) dans le sang total, le sérum ou le plasma humain. On le prévoit pour être employé comme test de dépistage et comme aide dans le diagnostic de l'infection avec le cruzi de T.  N'importe quel spécimen réactif avec Chagas Ab Rapid Test doit être confirmé avec des méthodes d'essai alternatives et des résultats cliniques.

RÉSUMÉ ET EXPLICATION DE L'ESSAI

La maladie de Chagas est une infection insecte-soutenue et zoonotique par le cruzi protozoan de T., qui cause une infection systémique des humains avec des manifestations aiguës et des conséquences à long terme. On l'estime que 16-18 millions de personnes sont infectées dans le monde entier, et approximativement 50 000 personnes meurent tous les ans de la maladie chronique de Chagas (l'Organisation Mondiale de la Santé) ^1.

L'examen et le xenodiagnosis de manteau saki chamois étaient le plus généralement le methods2,3 dans le diagnostic de l'infection aiguë de cruzi de T. Cependant, les deux méthodes sont longues ou manque de sensibilité.  Récemment, le sérodiagnostic devient le soutien principal dans le diagnostic de la maladie de Chagas. En particulier, l'antigène de recombinaison a basé des essais pour éliminer les réactions faussement positives qui sont généralement - vu dans les essais indigènes d'antigène^4-5.

L'essai rapide de Chagas IgG/IgM est un essai instantané d'anticorps qui ne détecte des anticorps d'IgG le cruzi de T. d'ici 15 minutes sans aucune condition d'instrument. En utilisant l'antigène de recombinaison spécifique de cruzi de T., l'essai est fortement sensible et spécifique.

PRINCIPE D'ESSAI

L'essai rapide de Chagas IgG/IgM est un immunoessai chromatographique d'écoulement latéral basé sur le principe de l'immunoessai indirect. La cassette d'essai se compose : 1) une protection conjuguée colorée par Bourgogne contenant de protéine conjugué avec de l'or colloïdal (la protéine A conjugue), 2) bande de membrane de nitrocellulose d'a contenant une bande d'essai (bande de T) et une bande de contrôle (bande de C). La bande de T est enduite d'un préenduisage avec des antigènes de recombinaison de cruzi de T., et la bande de C est enduite d'un préenduisage avec des anticorps de l'anti-protéine A.

Quand à volume approprié de spécimen d'essai est distribué dans l'échantillon bien de la cassette d'essai, le spécimen émigre par l'action capillaire à travers la cassette.  Les anticorps d'IgG au cruzi de T. si le présent dans le spécimen liera aux conjugués de la protéine A. L'immunocomplex est alors capturé sur la membrane par les antigènes enduits d'un préenduisage de cruzi de T., formant un Bourgogne a coloré la bande de T, indiquant un résultat d'essai positif de Chagas Ab. L'absence de la bande de T suggère un résultat négatif. L'essai contient un contrôle interne (bande de C) qui devrait montrer un Bourgogne a coloré la bande de l'immunocomplex de l'anticorps-protéine de l'anti-protéine A qu'un or conjugue indépendamment du développement de couleur sur la bande de T. Autrement, le résultat d'essai est invalide et le spécimen doit être retesté avec un autre dispositif.

STOCKAGE ET STABILITÉ

Magasin en tant qu'emballé dans la poche scellée à la température ambiante ou frigorifié (2-30°C). Le dispositif d'essai est stable par la date d'échéance imprimée sur la poche scellée. Le dispositif d'essai doit demeurer dans la poche scellée jusqu'à l'utilisation. NE GELEZ PAS. N'employez pas au delà de la date d'échéance.

PRÉCAUTIONS

·   Pour l'usage diagnostique in vitro professionnel seulement. N'employez pas après date d'échéance.

·   Portez les vêtements de protection tels que des manteaux de laboratoire, des gants jetables et la protection oculaire quand des spécimens sont examinés.

·   Ne mangez pas, ne buvez pas ou ne fumez pas dans le secteur où les spécimens ou les kits sont manipulés.

·   Manipulez tous les spécimens comme si ils contiennent des agents infectieux. Observe a établi des précautions contre des risques microbiologiques dans tout l'essai et suit les procédures standard pour la disposition appropriée des spécimens.

·   L'humidité et la température peuvent compromettre des résultats.

COLLECTION ET PRÉPARATION DE SPÉCIMEN

·   Le dispositif rapide d'essai de Chagas IgG/IgM (sang total/sérum/plasma) peut être exécuté utilisant le sang total (du venipuncture ou du fingerstick), le sérum ou le plasma.

·   Pour rassembler des spécimens de sang total de Fingerstick :

Lavez la main du patient laissent alors sécher. Massez la main sans toucher la piqûre. Perforez la peau avec un bistouri stérile. Essuyez loin le premier signe du sang. Frottez doucement la main du poignet à la paume au doigt pour former une goutte de sang arrondie au-dessus du site de piqûre. Ajoutez le spécimen de sang total de Fingerstick au dispositif d'essai à l'aide d'un tube capillaire ou des baisses accrochantes.

·   Sérum ou plasma distinct du sang dès que possible pour éviter le hemolysis. Employez seulement les spécimens clairs et non-hemolyzed.

·   L'essai devrait être réalisé juste après la collection de spécimen. Ne laissez pas les spécimens à la température ambiante pendant des périodes prolongées. Des spécimens de sérum et de plasma peuvent être stockés à 2-8°C pendant jusqu'à 3 jours. Pour l'entreposage à long terme, des spécimens devraient être gardés au-dessous du sang total de -20°C. rassemblé par venipuncture devraient être stockés à 2-8°C si l'essai doit être couru d'ici 2 jours de la collection. Ne gelez pas les spécimens de sang total. Du sang total rassemblé par le fingerstick devrait être examiné immédiatement.

·   Apportez les spécimens à la température ambiante avant d'examiner. Des spécimens gelés doivent être complètement dégelés et mélangés bien avant d'examiner. Des spécimens ne devraient pas être gelés et dégelés à plusieurs reprises.

·   Si des spécimens doivent être embarqués, ils devraient être emballés conformément aux règlements locaux couvrant le transport des agents étiologiques.

MATÉRIAUX

Matériaux fournis

Matériaux requis mais non fournis

●Conteneurs de collection de spécimen

●Bistouris (pour le sang total de fingerstick seul)

●Centrifugeuse

●Minuterie

●Tubes capillaires héparinisés et ampoule de distribution (pour le sang total de fingerstick seul)

PROCÉDURE D'ANALYSE

1.Bring la poche à la température ambiante avant de l'ouvrir. Enlevez le dispositif d'essai de la poche scellée et employez-le dès que possible.

2.Place le dispositif d'essai sur une surface propre et de niveau.

Tenez le compte-gouttes verticalement et transférez le µL 10 le µL du sang total ou 5 du plasma/du sérum au spécimen bien (s) du dispositif d'essai, puis ajoutez 2 gouttes de tampon à l'échantillon bien. Commencez la minuterie.

3.Wait pour que les discriminations raciales apparaissent. Résultats lus à 15 minutes. N'interprétez pas les résultats après 30 minutes.