Estradiol bovin (E2) ELISA Kit

Kit ELISA d'œstradiol bovin (E2)
Colis :96T
Échantillons : sérum, plasma sanguin, salive, urine et autres liquides tissulaires connexes.
 
UTILISATION PRÉVUE
Ce kit est utilisé pour doser l'estradiol (E2) dans l'échantillon de sérum bovin, de plasma sanguin et d'autres liquides biologiques connexes.
 
PRINCIPE D'ESSAI
Ce kit utilise un dosage immuno-enzymatique (ELISA) basé sur la technologie sandwich double anticorps biotine pour doser l'estradiol bovin (E2).Ajouter Estradiol (E2) aux puits, qui sont pré-revêtus d'anticorps monoclonal Estradiol (E2), puis incuber.Après cela, ajoutez des anticorps anti-E2 marqués à la biotine pour s'unir à la streptavidine-HRP, qui forme un complexe immun.Retirer les enzymes non liées après incubation et lavage.Ajouter les substrats A et B. Ensuite la solution va virer au bleu et virer au jaune sous l'effet de l'acide.Les teintes de la solution et la concentration en Estradiol Bovin (E2) sont positivement corrélées.
 
MATERIEL FOURNI DANS LE KIT DE TEST

 
MATERIEL REQUIS MAIS NON FOURNI
1. Incubateur 37 ℃ 2. Lecteur d'enzymes standard
3. Pipettes de précision et pointes de pipettes jetables 4. Eau distillée
5. Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6. Papier absorbant
 
NOTES IMPORTANTES
1. Avant d'ouvrir le kit maintenu à la température de 2-8℃, il faut au moins 30 minutes pour augmenter naturellement à température ambiante.Après avoir rompu le sceau de la plaque enduite ELISA, certaines des bandes utilisées doivent être conservées dans un sac hermétique.
2. Lors de l'ajout d'échantillons, l'injecteur d'échantillon doit être utilisé à chaque fois et doit également être fréquemment vérifié pour sa précision afin d'éviter toute erreur individuelle.
3. L'instruction doit être strictement suivie tandis que la lecture du lecteur ELISA doit être définie comme la norme pour déterminer le résultat de l'expérience.
4. Les embouts de pipette et la membrane de la plaque d'étanchéité en main ne doivent pas être utilisés plus d'une fois afin d'éviter toute contamination croisée.
5.Tous les échantillons, les concentrations de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés comme agents infectieux.
6. Les autres réactifs non nécessaires doivent être emballés ou couverts.Les réactifs de différents lots ne doivent pas être mélangés et doivent être utilisés avant leurs dates de validité respectives.
7. Le substrat B est sensible à la lumière et ne doit donc pas être exposé trop longtemps à la lumière.
 
MÉTHODE DE LAVAGE
Méthode de lavage manuel :Lavage à la main : Secouer les liquides des puits de la plaque ELISA ;Poser plusieurs papiers absorbants sur le banc d'essai et tapoter fortement la plaque ELISA plusieurs fois vers le bas ;puis injectez au moins 0,35 ml de solution de lavage diluée pendant 1 à 2 minutes de trempage.Répétez ce processus si nécessaire.
Méthode de lavage automatique :Lavage par laveur de plaques automatique : S'il existe un laveur de plaques automatique, il ne doit être utilisé dans le test que si vous maîtrisez bien ses fonctions.
 
PRÉCISION
Précision intra-essai (précision au sein d'un essai) : 3 échantillons avec E2 bovin de niveau faible, moyen et élevé ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.
Précision inter-essais (précision entre les essais) : 3 échantillons avec E2 bovin de niveau faible, moyen et élevé ont été testés sur 3 plaques différentes, 8 réplicats dans chaque plaque.
CV(%) = ET/moyenneX100
Intra-essai : CV<10 %
Inter-essai : CV<12 %
 
EXIGENCES RELATIVES AUX ÉCHANTILLONS
1.Les échantillons contenant du NaN3 ne doivent pas être testés car ils inhibent l'activité de la peroxydase de raifort (HRP).
2.Après le prélèvement de l'échantillon, l'extraction doit être immédiatement effectuée conformément aux documents connexes.Après l'extraction, l'expérience doit également être menée immédiatement.Sinon, conservez l'échantillon à -20℃.Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.
3. Sérum : laissez le sérum coaguler pendant 10 à 20 minutes à température ambiante.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Lorsque des sédiments se sont formés pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.
4. Plasma sanguin : conformément aux exigences de prélèvement d'échantillons, l'EDTA ou le citrate de sodium doivent être utilisés comme anti-coagulation.Ajouter de l'EDTA ou du citrate de sodium et mélanger pendant 10 à 20 minutes.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant environ 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Lorsque des sédiments se sont formés pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.
5.Urine : Recueillir par tube stérile.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant environ 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Lorsque des sédiments se sont formés pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.Lors du prélèvement de liquide pleuropéritonéal et de liquide céphalo-rachidien, veuillez suivre les procédures mentionnées ci-dessus.
6. Surnageant de culture cellulaire : Recueillir dans des tubes stériles lors de l'examen des composants sécrétés.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant environ 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Lors de l'examen des composants dans la cellule, utilisez du PBS (PH 7,2-7,4) pour diluer la suspension cellulaire à la concentration cellulaire d'environ 1 million/ml.Endommagez les cellules par des cycles répétés de gel-dégel pour laisser sortir les composants internes.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant environ 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Lorsque des sédiments se sont formés pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.
7. Échantillon de tissu : inciser l'échantillon et le peser.Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4).Congeler avec de l'azote liquide immédiatement pour une utilisation ultérieure.Décongelez l'échantillon et conservez-le à 2-8℃.Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4) puis homogénéiser soigneusement l'échantillon à la main ou avec un homogénéisateur.Centrifuger (à 2000-3000 RPM) pendant environ 20 minutes.Recueillir soigneusement les surnageants.Aliquotez et gardez-en un pour examen et congelez les autres pour une utilisation ultérieure.
 
 

Rebecca Yan