Oxydase superbe humaine Dimutase (GAZON) ELISA

ELISA humaine de super oxydase dimutase (SOD)

Types d'échantillons validés : Sérum, plasma sanguin, salive, urine et autres liquides tissulaires apparentés.

Utilisation prévue

Ce kit est utilisé pour doser la super oxydase dimutase (SOD) dans l'échantillon de sérum humain, de plasma sanguin et d'autres liquides tissulaires apparentés.

Principe d'essai

Le kit utilise un dosage immuno-enzymatique (ELISA) sandwich à double anticorps pour doser le niveau de super oxydase dimutase humaine (SOD) dans les échantillons.Ajouter la super oxydase dimutase (SOD) au puits d'enzyme d'anticorps monoclonal qui est pré-enduit d'anticorps monoclonal de super oxydase dimutase humaine (SOD), incubation ;puis, ajoutez des anticorps Super Oxidase Dimutase (SOD) marqués à la biotine et combinés avec Streptavidin-HRP pour former un complexe immun ;puis effectuer à nouveau une incubation et un nouveau lavage pour éliminer l'enzyme non combinée.Ajoutez ensuite la solution chromogène A, B, la couleur du liquide vire au bleu, Et sous l'effet de l'acide, la couleur devient finalement jaune.Le chroma de couleur et la concentration de la substance humaine super oxydase dimutase (SOD) de l'échantillon étaient positivement corrélés.

Matériel fourni dans le kit de test

Matériel nécessaire mais non fourni

1. Incubateur 37 ℃ 2. Lecteur d'enzymes standard

3. Pipettes de précision et pointes de pipettes jetables 4. Eau distillée

5. Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6. Papier absorbant

Notes IMPORTANTES

1. Sorti de l'environnement 2-8℃, le kit doit être équilibré 30 minutes à température ambiante puis utilisé.Si les plaques revêtues d'enzyme n'ont pas été utilisées après ouverture, les plaques restantes doivent être stockées dans un sac scellé.

2. Pour chaque étape, ajoutez l'échantillon avec l'injecteur d'échantillon qui doit être calibré fréquemment, afin d'éviter une tolérance expérimentale inutile.

3. L'opération doit être effectuée conformément aux instructions strictement.Et les résultats des tests doivent être basés sur les lectures du lecteur Enzyme.

4. Afin d'éviter toute contamination croisée, il est interdit de réutiliser la tête d'aspiration et la membrane de la plaque d'étanchéité dans vos mains.

5. Tous les échantillons, le tampon de lavage et chaque type de rejet doivent être conformes au processus de matériel infectieux.

6. Les agents oisifs doivent être logés ou couverts.Ne pas utiliser de réactif avec des lots différents.Et utilisez-les avant la date d'expiration.

7. Le substrat B est sensible à la lumière.L'exposition prolongée à la lumière est interdite.

Méthode de lavage

Méthode de lavage manuel :secouez le liquide restant dans les plaques d'enzymes ;placez des papiers absorbants sur le banc d'essai et rabattez fortement les plaques à l'envers.Injectez au moins 0,35 ml de solution de lavage après dilution dans le puits et laissez mariner 1 à 2 minutes.Répétez ce processus selon vos besoins.

Méthode de lavage automatique :s'il y a une machine à laver automatique, elle ne doit être utilisée dans le test que si vous connaissez bien son fonctionnement et ses performances.

Précision

Précision intra-essai (précision au sein d'un essai) : 3 échantillons avec SOD humaine de niveau faible, moyen et élevé ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.

Précision inter-essais (précision entre les essais) : 3 échantillons avec SOD humaine de niveau faible, moyen et élevé ont été testés sur 3 plaques différentes, 8 réplicats dans chaque plaque.

CV(%) = ET/moyenneX100

Intra-essai : CV<10 %

Inter-essai : CV<12 %

Exigences relatives aux spécimens

1. Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité HRP.

2. extraire dès que possible après la collecte des échantillons, et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté dès que possible après l'extraction.Si ce n'est pas le cas, l'échantillon peut être conservé à -20 ℃ pour le conserver, évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

3. Sérum - coagulation à température ambiante 10-20 min, centrifugation 20 min à la vitesse de 2000-3000 tr/min éliminer le surnageant, si une précipitation apparaît, centrifuger à nouveau.

4.plasma-use adapté EDTA ou plasma citrate comme anticoagulant, mélanger 10-20 minutes, centrifugation 20 minutes à la vitesse de 2000-3000 tr/min éliminer le surnageant, si une précipitation apparaît, centrifuger à nouveau.

5. Urine-collect sue un récipient stérile, centrifugation 20 min à la vitesse de 2000-3000 rpm enlever le surnageant, Si une précipitation apparaît, Centrifuger à nouveau.Le fonctionnement de l'hydrothorax et du liquide céphalo-rachidien Référence à celui-ci.

6. surnageant de culture cellulaire-détecter les composants sécrétoires, collecter un récipient stérile, centrifugation 20 minutes à la vitesse de 2000-3000 tr/min éliminer le surnageant, détecter la composition des cellules, diluer la suspension cellulaire avec du PBS (PH7.2-7.4), La concentration cellulaire atteint 1 million/ml, cycles de congélation-décongélation répétés, endommage les cellules et libère les composants intracellulaires, centrifugation 20 min à la vitesse de 2000-3000 rpm élimine le surnageant, Si une précipitation apparaît, Centrifuger à nouveau.

7. Échantillons de tissus - Après avoir coupé les échantillons, vérifiez le poids, ajoutez du PBS (PH7.2-7.4), rapidement congelé avec de l'azote liquide, maintenez les échantillons à 2-8 ℃ après la fusion, ajoutez du PBS (PH7.4), homogénéisé à la main ou Broyeurs, centrifugation 20 min à la vitesse de 2000-3000 tr/min éliminer le surnageant.