Kit de test Elisa pour le clenbutérol - Sécurité alimentaire

Clenbutérol Elisa Kit - Sécurité alimentaire

Utilisation prévue

Le kit ELISA Clenbuterol est un test immunosorbant direct lié à l' enzyme pour la détection quantitative de la présence de Clenbuterol dans des échantillons de tissus, d' urine et d' aliments pour animaux.

Sensitivité:0.05 ppb

Limites de détection:Tissus d'origine animale 0,2 ppb / 0,05 ppb

Urine 0,05 ppb

Alimentaire 2,5 p.p.

Taux de récupération:90% ± 15% (foie de porc, fourrage 80%±15%)

Componente du kit

• 1 X plaque de microtiter (8 micro-puits X 12 bandes amovibles)
• 6 X Solution standard (1 ml chacune): 0 ng/ mL, 0,05 ng/ mL, 0,15 ng/ mL, 0,45 ng/ mL, 0,9 ng/ mL, 1,8 ng/ mL
• 1 X anticorps contre le clenbutérol (6 ml)
• 1 X anticorps HRP conjugué (6 ml)
• 1 X tampon de dilution de l'échantillon (30 ml)
• 1 X Concentré de tampon de lavage (10 X, 50 ml)
• 1 X Substrate A (6 ml)
• 1 X Substrate B (6 ml)
• 1 X Solution d'arrêt (6 ml)
• 1 X Manuel du produit
• Matériaux requis mais non fournis
• Lecteur de plaque ELISA Microtiter équipé de filtres de 450 nm

- micropipette multicanal de 50 ¢ 200 μL

- micropipettes de précision de 50, 100 et 200 μL

- Laveuse à microplaques ou bouteille de pressage

- Homogénéiseur

- Une centrifugeuse.

- Tubes centrifuges

- De l'eau distillée

- HCl, NaOH

Préparation des solutions de travail

Puffer de lavage: diluer 10X le concentré avec de l'eau distillée (c'est-à-dire 1 ml + 9 ml).

2% de NaCl: dissoudre 2,0 ± 0,01 NaCL dans 100 ml d'eau distillée dans un bol

0.1M HCl: dilué 8,33 mlconcentrées hydrochloré acideavec de l'eau distillée et rendre le volume constant à 1 L, OU diluer 10X 1M HCl avec de l'eau distillée (c'est-à-dire 1 mL + 9 mL).

Solution d'extrait de tissu animal: mélanger une solution à 2% de NaCl avec 0,1 M HCl au rapport volumique 4:1.

La solution standard, le conjugué lié à l'enzyme, le substrat A, le substrat B et la solution de suspension sont prêts à l'emploi.

1. Préparation des échantillons
   1. Urine (facteur de dilution 1)

• Prenez 50 μl d'échantillon d'urine transparente directement pour l'analyse. (Si l'échantillon d'urine est trouble, veuillez le filtrer ou le centrifuger pour le dégager et utiliser le surnaturant.) Si la concentration de clenbutérol est élevée, diluer avec de l'eau distillée avant l'essai..
• Tissu/foie d'animal

Méthode 1 (facteur de dilution: 4):

• Homogénéiser l'échantillon (libre de matières grasses) pendant 1 minute à 10 000 tours/minute.
• Pesez 1,0 ± 0,01 g d'homogéné dans un tube centrifuge de 15 ml. Si le tissu animal, veuillez ajouter 3 ml de solution d'extrait et bien mélanger; si le foie, veuillez ajouter 3 ml de 0,1 M HCl, agiter pendant 5 min.
• Faire une centrifugation à 5000 tr/min à 20-25 °C pendant 5 min.
• Prenez 1 ml de supernatant et mélangez-le avec 2 ml de polystyrène dans un tube de centrifugeuse, puis ajoutez 15 μl de 1 M NaOH et mélangez bien.
• Prendre 50 μl de liquide de la phase d'eau pour l'analyse.

Méthode 2 (facteur de dilution: 1):

• Homogénéiser l'échantillon (libre de matières grasses) pendant 1 minute à 10 000 tours/minute.
• On pèse 2,0 ± 0,01 g d'homogéné dans un tube centrifuge de 15 ml, on ajoute 6 ml d'alcool méthyle et on secoue pendant 5 min.
• Faire une centrifugation à 5000 tr/min pendant 5 min.
• Prenez 1,5 ml de surnaturant (couche d'alcool méthyle) dans un tube en verre et séchez-le à 50 °C avec un débit d'azote.
• Le résidu est complètement dissous par 0,5 ml de tampon de dilution de l'échantillon, puis 0,5 ml de n-hexane sont ajoutés.
• Débarrasser la couche supérieure et prélever 50 μl de liquide pour analyse.
  1. Aliments pour animaux (facteur de dilution 50)
• Pesez 2,0 ± 0,01 g d'échantillon de nourriture broyé dans un tube centrifuge de 50 ml. Ajoutez 2 ml de 1 M HCl et 16 ml d'eau distillée. Agitez pour bien mélanger.
• Centrifugez à 5000 tr/min pendant 5 min à température ambiante.
• Prenez 200 μl de supernatant dans un tube centrifuge de 1,5 ml et mélangez bien avec 800 μl de tampon de dilution de l'échantillon.
• Réglez la valeur du pH à 7,0 à 8,0 par 15 UL 1M NaOH.
• Prenez 50 I.U. pour le test.