Ractopamine Elisa Kit pour la sécurité alimentaire, 96T

Ractopamine Elisa Kit Sécurité alimentaire

Utilisation prévue

Le Ractopamine ELISA Kit est un test immunosorbant indirect lié aux enzymes pour la détection quantitative de la présence de la ractopamine dans des échantillons de tissus, d' urine et d' aliments pour animaux.

Sensitivité:0.025 ppb

Limites de détection:Tissus d'origine animale 0,1 ppb / 0,025 ppb

Urine 0,025 ppb

Alimentaire 1,25 p.p.

Taux de récupération:90% ± 15% (foie de porc, fourrage 80% ± 15%)

Componente du kit

• 1 X plaque de microtiter (8 micro-puits X 12 bandes amovibles)
• 6 X Solution standard (1 ml chacune): 0 ng/ mL, 0,025 ng/ mL, 0,075 ng/ mL, 0,225 ng/ mL, 0,675 ng/ mL, 2,025 ng/ mL
• 1 X anticorps à la ractopamine (6 ml)
• 1 X anticorps HRP conjugué (6 ml)
• 1 X tampon de dilution de l'échantillon (30 ml)
• 1 X Concentré de tampon de lavage (10 X, 50 ml)
• 1 X Substrate A (6 ml)
• 1 X Substrate B (6 ml)
• 1 X Solution d'arrêt (6 ml)
• 1 X Manuel du produit

1. Matériaux requis mais non fournis

• Lecteur de plaque ELISA Microtiter équipé de filtres de 450 nm

- micropipette multicanal de 50 à 200 μL

- micropipettes de précision de 50, 100 et 200 μL

- Laveuse à microplaques ou bouteille de pressage

- Homogénéiseur

- Une centrifugeuse.

- Tubes centrifuges

- De l'eau distillée

- HCl, NaOH

Préparation des solutions de travail

Puffer de lavage: diluer 10X le concentré avec de l'eau distillée (c'est-à-dire 1 ml + 9 ml).

1 M HCl: dilué 8,33 mlconcentrées hydrochloré acideavec de l'eau distillée et rendre le volume constant à 100 ml, OU diluer 10X 1M HCl avec de l'eau distillée (c'est-à-dire 1 ml + 9 ml).

Solution d' extraction: mélanger 8 g de NaCl avec 100 ml de 1 M HCl.

La solution standard, le conjugué lié à l'enzyme, le substrat A, le substrat B et la solution de suspension sont prêts à l'emploi.

Préparation des échantillons

1.Tissus d'animaux

Méthode 1 (facteur de dilution: 4):

• Homogénéiser l'échantillon (libre de matières grasses) pendant 1 minute à 10 000 tours/minute.
• On pèse 2,0 g d'homogéné dans un tube centrifuge de 15 ml, on ajoute 6 ml de solution d'extrait, on mélange bien et on agite pendant 5 min.
• Faire une centrifugation à 5000 tr/min à 20-25 °C pendant 5 min.
• Prenez 1 ml de supernatant dans le tube de centrifugeuse en polystyrène et mélangez-le avec 20 μl de 1 M NaOH.0.
• Prendre 50 μl de liquide de la phase d'eau pour l'analyse.

Méthode 2 (facteur de dilution: 1):

• Homogénéiser l'échantillon (libre de matières grasses) pendant 1 minute à 10 000 tours/minute.
• Pesez 2,0 g d'homogéné dans un tube centrifuge de 15 ml, ajoutez 6 ml d'alcool méthyle et agitez pendant 5 min.
• Faire une centrifugation à 5000 tr/min à 20-25 °C pendant 5 min.
• Prenez 1,5 ml de supernatant (couche organique) dans un tube en verre et séchez-le à 50 °C avec un débit d'azote.
• Le résidu est dissous par 0,5 ml de tampon de dilution de l'échantillon et 0,5 ml de n-hexane sont ajoutés.
• Transférer 1 ml dans le tube de centrifugeuse.
• Débarrasser la couche supérieure et prélever 50 μl de liquide pour analyse.
• 2.Urine (facteur de dilution 1)
• Prenez 50 μL d'urine transparente directement pour l'analyse, et diluez-la avec de l'eau distillée avant l'analyse si la concentration de ractopamine est élevée.
• 3.Aliment alimentaire (facteur de dilution 50)
• On pèse 2 g d'échantillon de fourrage déchiqueté dans un tube centrifuge de 50 ml, on ajoute 2 ml de 1 M HCl et 16 ml d'eau distillée, on ajoute 1,6 g de NACL et on mélange bien.
• Faire une centrifugation à 5000 tr/min à 20-25 °C pendant 5 min.
• Prendre 200 μl de supernatant et bien mélanger avec 800 μl de tampon de dilution de l'échantillon.
• Ajustez la valeur du pH à 7,0 à 8,0 par 1 M NaOH.

Prenez 50 μL pour l'analyse.