Anti-MullerianH hormone humaine (AMH) Elisa Kit pour l'usage diagnostique

Anti-MullerianH hormone humaine (AMH) Elisa Kit pour l'usage diagnostique

Utilisation prévue
L'utilisation prévue de ce kit est de détecter la concentration de la substance inhibante de Mullerian a également appelé Anti-Mullerian Hormone (MIS/AMH) dans l'échantillon du sérum de l'humain, du plasma sanguin, et de tout autre liquide relatif de tissu.

Chaîne de détection
160 pg/ml - 5000pg/ml de MIS/AMH.

Principe d'essai
Le kit emploie une analyse d'immunosorbant enzyme-liée par sandwich de double-anticorps (ELISA) pour détecter le niveau de la substance inhibante humaine de Mullerian/d'anti-Mullerian hormone (MIS/AMH) dans les échantillons. Dans l'analyse, des calibreurs, les contrôles et les échantillons sont incubés dans les puits de microtitration qui ont été enduits d'un préenduisage avec du l'anti-AMH anticorps. Après incubation et lavage, anti- l'anticorps de détection de MIS/AMH marqué avec HRP est ajouté à chaque puits ; Après incubation et lavage supplémentaires, le développement de couleur est effectué en ajoutant le substrat de TMB, le liquide deviendra bleu, et à l'extrémité en ajoutant l'acide, la couleur changera pour jaunir. La densité de la couleur est franchement de dépendre de la concentration de MIS/AMH dans l'échantillon examiné. À l'aide de la courbe standard de MIS/AMH et d'OD450 de mesure des échantillons d'essai, la concentration de MIS/AMH dans l'échantillon examiné peut être correctif calculée.

Matériaux assurés dans le kit

Note
1. Ce kit n'est pas bon pour détecter des échantillons contenir Nan₃, parce queNan₃ empêche HRP actif.
2. des spécimens doivent être extraits dès que possible et examinés après collection. Les spécimens devraient être maintenus dans -20℃ mais éviter gel-dégel répété, sinon capable exécuter l'expérience après extraction.

Procédure d'analyse

1. Normes : Ce kit contient les réactifs standard prêts à employer que So-S6 avec la concentration a montrés ci-dessous.

2. Prélevez l'addition et l'incubation :

l Puits de marques des bandes enduites d'un préenduisage de microplate pour le blanc (ainsi), la norme (S1-S6) et les échantillons, respectivement.

l Pour les puits masquer et de norme, ajoutent 50μl ainsi, S1, S2, S3, S4, S5, S6, respectivement.

l Aux puits chaque témoin, ajoutez 40μl de diluant témoin et 10μl de l'échantillon à examiner (dilution 5x).

l Plat de joint avec la membrane de cachetage, et incubé pendant 60 minutes au ℃ 37 avec secouer doucement.
3.Washing :
Diluez le 20ml de la solution 20×Wash (fournie) avec 380ml d'eau distillée pour faire la solution du lavage 1X. Enlevez la membrane de scellage du plat soigneusement, et vidangez le liquide pour vider tous les puits en tapant l'upsidedown de plat sur le papier de serviette.
À chaque puits, ajoutez l'UL 200 de la solution du lavage 1X, vidangez le liquide et vider tous les puits en tapant l'upsidedown de plat sur le papier de serviette. Répétez un tel lavage 3 fois.
4. réaction :
Ajoutez 50μl de réactif de HRP-conjugué à chaque puits, excepté les puits pour le blanc. Plat de joint avec la membrane de cachetage, et incubé pendant 60 minutes au ℃ 37 avec secouer doucement.
5. lavage :
Enlevez la membrane de scellage du plat soigneusement, et vidangez le liquide, videz tous les puits en tapant l'upsidedown de plat sur le papier de towl. À chaque puits, ajoutez l'UL 200 de la solution du lavage 1X, vidangez le liquide et vider tous les puits en tapant l'upsidedown de plat sur le papier de towl. Répétez un tel lavage 3 fois.
6. développement de couleur :
À chaque puits, ajoutez 50μl de la solution A de chromogène et 50μl de la solution B, mélange de chromogène en secouant doucement, puis incubez pour la minute environ 10 à 37℃ (gardez à partir de la lumière).
7. arrêt :
Quand la couleur bleue désirée est apparue, ajoutez 50μl de solution d'arrêt à chaque puits pour arrêter la réaction (la couleur bleue changera en jaune immédiatement).
8. mesure :
Utilisant le lecteur de microplate, mesurez la densité optique (OD) au-dessous de 450 nanomètre dans chacun des puits et établissement du blanc bien en tant que zéro. La mesure devrait être effectuée dans 15min après s'être ajouté arrêtent la solution.