Anticardiolipin humain IgG (ACA IgG) ELISA Kit, 96T/Kit

Kit ELISA pour les IgG anti-cardiolipine humaine ((ACA IgG)

Types d'échantillons validés:sérum, plasma sanguin, salive, urine et autres tissus apparentés.

À des fins de recherche uniquement, non à des fins de diagnostic.

Le kit ELISA est basé sur le principe de la technique du sandwich à double antigène pour détecter l' IgG anti-cardiolipine humaine ((ACA IgG).Utiliser uniquement à des fins de rechercheNe pas utiliser pour le diagnostic médical.

Utilisation prévue

Ce kit est utilisé pour évaluer l' IgG anti-cardiolipine ((ACA IgG) dans l' échantillon de sérum humain, de plasma sanguin et d' autres tissus connexes.

Principe de l'essai

Le kit utilise un test d' immunosorbent double-antigène sandwich lié à l' enzyme (ELISA) pour évaluer le niveau d' IgG anti-cardiolipine humaine (ACA IgG) dans les échantillons.Ajouter de l'IgG anti-cardiolipine humaine ((ACA IgG) à un puits de micro-l'IgG anti-cardiolipine humaine pré-couvertAprès une autre incubation et un autre lavage, retirez l'enzyme non liée, puis ajoutez la solution de chromogène A, B,la couleur du liquide change en bleu, et à l'effet de l'acide, la couleur finit par devenir jaune.et comparer avec la valeur critique pour déterminer l'existence de l' IgG anti-cardiolipine humaine ((ACA IgG) de l' échantillon.

Matériaux fournis dans le kit d'essai

Matériaux requis mais non fournis

1. incubateur à 37 °C 2. lecteur d'enzyme standard

3- Pipettes de précision et tuyaux jetables 4.

5- Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6.

Notes importantes

1Si la bande de microelisa n'a pas été utilisée après ouverture, elle doit être conservée pendant 30 minutes à température ambiante.la plaque doit être conservée dans un sac scellé.

2.Ajouter l'échantillon avec l'échantillonneur à chaque étape, et corriger sa précision fréquemment, éviter l'erreur expérimentale.

3.Il est recommandé que tous les matériaux standard, les échantillons d'essai soient doublés.Si la teneur en matière d'essai dans l'échantillon est trop élevée,s'il vous plaît utiliser la dilution de l'échantillon pour diluer certains multiples (n fois)S'il vous plaît multiplier les temps de dilution totale lors du calcul ((×n×5)

4.L'opération doit être effectuée en stricte conformité avec les instructions, les résultats de l'essai doivent être basés sur un lecteur de microplaques pour déterminer les lectures doivent prévaloir

5.Pour éviter la contamination croisée, pour éviter la réutilisation dans les mains de la tête d'aspiration et de la membrane de la plaque d'étanchéité

6.Les autres agents ne doivent pas être emballés ou recouverts.Ce réactif dont les composants de numéro de lot ne sont pas mélangés.

Méthode de lavage manuel

secouez le liquide restant dans les plaques enzymatiques, placez des feuilles de papier sur le banc d'essai et battez fortement les plaques à l'envers.35 ml de solution de lavage après dilution dans le puitsRépétez ce processus selon vos besoins.

Méthode de lavage automatique

s'il existe une machine à laver automatique, elle ne doit être utilisée dans l'essai que si vous connaissez bien sa fonction et ses performances.

Exigences relatives aux échantillons

1Les échantillons contenant du NaN3 ne doivent pas être testés car ils inhibent l'activité de la peroxydase du radis de cheval (HRP).

2Après la collecte de l'échantillon, l'extraction doit être effectuée immédiatement conformément aux documents correspondants. Après l'extraction, l'expérience doit également être réalisée immédiatement.conserver l'échantillon à -20°CÉvitez les cycles de congélation et de dégel répétés.

3.Sérum: laisser le sérum coaguler pendant 10 à 20 minutes à température ambiante. Centrifugez (à 2000 à 3000 tr/min) pendant 20 minutes.La centrifugation doit être effectuée à nouveau..

4.Plasma sanguin: conformément aux exigences de la collecte d'échantillons, l'EDTA ou le citrate de sodium doivent être utilisés comme anticoagulants.Centrifugeuse (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutesLorsque des sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.

5.Urine: collecte par tube stérile. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Collectez les surnaturants avec soin.La centrifugation doit être effectuée à nouveau.. Lors du prélèvement du liquide pleuropéritonéal et du liquide céphalo-rachidien, veuillez suivre les procédures mentionnées ci-dessus.

6.Supernatant de culture cellulaire: collecte par tubes stériles lors de l'examen des composants sécrétés. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Collectez les supernatants avec soin.Lors de l'examen des composants de la cellule, utiliser du PBS (PH 7.2-7.4) pour diluer la suspension cellulaire à une concentration cellulaire d'environ 1 million/ml.Centrifugeuse (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutesLorsque des sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.

7.Échantillon de tissu: échantillon incisé et pesé. Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4). Congeler immédiatement avec de l'azote liquide pour une utilisation ultérieure. Dégeler l'échantillon et le conserver à 2-8°C.Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7.4) puis homogénéiser l'échantillon à fond à la main ou par homogénéiseur. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Ramassez soigneusement les surnaturants.Aliquot et conserver une pour examen et congeler les autres pour une utilisation ultérieure.

Procédure d'évaluation

1. Définir les puits vides séparément (les puits vides n'ajoutent pas d'échantillon et de réactif HRP-conjugué, autrement chaque étape est la même), les puits standard, puits d'échantillonnage.Ajouter 50 μl standard dilué au puits standard; Ajouter l'échantillon de dilution de 40 μl à l'échantillon d'essai bien qui sur la plaque d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai de 10 μl (échantillon de dilution finale est de 5 fois), et mélanger secouant doucement, incubé 30 minutes à 37 °C.

2. Jetez le liquide, séchez, chaque puits pour remplir 30 fois le liquide de lavage dilué, oscillation pendant 30 secondes, jetez le liquide de lavage avec du papier absorbant Pat sec. Répétez cinq fois, Pat sec.

3. Ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, à l'exception du puits vierge. Mélanger en agitant doucement, incubé 30 minutes à 37 °C.

4. Jetez le liquide, séchez, chaque puits pour remplir 30 fois le liquide de lavage dilué, oscillation pendant 30 secondes, jetez le liquide de lavage avec du papier absorbant Pat sec. Répétez cinq fois, Pat sec.

5. Ajouter à chaque puits une solution de chromogène A 50μl et une solution de chromogène B 50μl. Mélanger doucement, incuber pendant 10 min à 37°C.

6. Ajouter Stop Solution50μl à chaque puits, arrêter la réaction ((le changement de couleur bleue à jaune immédiatement).

7. Prenez le puits vide à zéro, mesurez la densité optique (OD) à 450 nm après ajout de la solution d'arrêt et dans les 15 min