Kit de test ELISA pour la dihydrotestostérone humaine (DHT)

Types d'échantillons validés:Sérum, plasma sanguin, salive, urine et autres liquides tissulaires connexes.

POUR USAGE RECHERCHE SEULEMENT. NE PAS UTILISER DANS LES PROCÉDURES DE DIAGNOSTIC.

Veuillez lire entièrement cette notice avant d'utiliser le produit. Ce kit est utilisé pour doser la Dihydrotestostérone humaine (DHT) sur la base de la technologie du sandwich à double anticorps à la biotine. Ce kit Elisa utilise une méthode en une étape avec laquelle les solutions n'ont pas besoin d'être diluées, car nous simplifions le processus de dilution grâce à nos techniques de laboratoire. Ce kit est destiné à la recherche uniquement et ne doit pas être utilisé dans les procédures de diagnostic.

Utilisation prévue

Ce kit est utilisé pour doser la Dihydrotestostérone (DHT) dans l'échantillon de sérum humain, de plasma sanguin et d'autres liquides biologiques connexes.

Principe du test

Ce kit utilise un test immuno-enzymatique (ELISA) basé sur la technologie du sandwich à double anticorps à la biotine pour doser la Dihydrotestostérone humaine (DHT). Ajoutez de la Dihydrotestostérone (DHT) dans les puits, qui sont pré-revêtus avec un anticorps monoclonal anti-Dihydrotestostérone (DHT), puis incubez. Après cela, ajoutez des anticorps anti-DHT marqués à la biotine pour s'unir à la streptavidine-HRP, ce qui forme un complexe immun. Retirez les enzymes non liées après l'incubation et le lavage. Ajoutez le substrat A et B. Ensuite, la solution deviendra bleue et virera au jaune sous l'effet de l'acide. Les nuances de la solution et la concentration de Dihydrotestostérone humaine (DHT) sont positivement corrélées.

Matériels fournis dans le kit de test

Matériels requis mais non fournis

1. Incubateur 37 ℃ 2. Lecteur d'enzymes standard

3. Pipettes de précision et pointes de pipettes jetables 4. Eau distillée

5. Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6. Papier absorbant

Notes importantes

1. Avant d'ouvrir le kit conservé à une température de 2-8 ℃, il faut au moins 30 minutes pour qu'il atteigne naturellement la température ambiante. Après avoir brisé le sceau de la plaque ELISA revêtue, certaines des bandes utilisées doivent être conservées dans un sac hermétique.

2. Lors de l'ajout d'échantillons, un injecteur d'échantillons doit être utilisé à chaque fois et sa précision doit également être fréquemment vérifiée pour éviter les erreurs individuelles.

3. La notice doit être strictement suivie, tandis que la lecture du lecteur ELISA doit être définie comme la norme pour déterminer le résultat de l'expérience.

1. Les pointes de pipette et la membrane de scellement de la plaque en main ne doivent pas être utilisées plus d'une fois afin d'éviter la contamination croisée.

5. Tous les échantillons, la concentration de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés comme des agents infectieux.

6. Les autres réactifs non nécessaires doivent être emballés ou recouverts. Les réactifs de différents lots ne doivent pas être mélangés et doivent être utilisés avant leurs dates de validité respectives.

7. Le substrat B est sensible à la lumière et ne doit donc pas être exposé à la lumière trop longtemps.

Méthode de lavage

Méthode de lavage manuelle : Lavage à la main : Secouez les liquides dans les puits de la plaque ELISA ; Déposez plusieurs papiers buvard sur le lit d'essai et tapotez fort la plaque ELISA plusieurs fois vers le bas ; puis injectez au moins 0,35 ml de concentré de lavage dilué pendant 1 à 2 minutes de trempage. Répétez ce processus au besoin.

Méthode de lavage automatique : Lavage par lave-plaque automatique : S'il existe un lave-plaque automatique, il ne doit être utilisé dans le test que si vous connaissez bien ses fonctions.

Précision

Précision intra-essai (précision au sein d'un essai) : 3 échantillons avec des niveaux bas, moyens et élevés de DHT humaine ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.

Précision inter-essais (précision entre les essais) : 3 échantillons avec des niveaux bas, moyens et élevés de DHT humaine ont été testés sur 3 plaques différentes, 8 réplicats dans chaque plaque.

CV(%) = ÉT/moyenneX100

Intra-essai : CV<10%

Inter-essai : CV<12%

Exigences relatives aux spécimens

1. Les échantillons contenant du NaN3 ne doivent pas être testés car il inhibe l'activité de la peroxydase de raifort (HRP).

2. Après avoir prélevé l'échantillon, l'extraction doit être effectuée immédiatement conformément aux documents connexes. Après l'extraction, l'expérience doit également être menée immédiatement. Sinon, conservez l'échantillon à -20 ℃. Évitez les cycles de congélation-décongélation répétés.

3. Sérum : Laisser le sérum coaguler pendant 10 à 20 minutes à température ambiante. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Lorsque des sédiments se produisent pendant le stockage, une centrifugation doit être effectuée à nouveau.

4. Plasma sanguin : Conformément aux exigences de prélèvement d'échantillons, de l'EDTA ou du citrate de sodium doit être utilisé comme anticoagulant. Ajouter de l'EDTA ou du citrate de sodium et les mélanger pendant 10 à 20 minutes. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Lorsque des sédiments se produisent pendant le stockage, une centrifugation doit être effectuée à nouveau.

5. Urine : Prélever à l'aide d'un tube stérile. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Lorsque des sédiments se produisent pendant le stockage, une centrifugation doit être effectuée à nouveau. Lors du prélèvement de liquide péritonéal et de liquide céphalorachidien, veuillez suivre les procédures susmentionnées.

6. Surnageant de culture cellulaire : Prélever à l'aide de tubes stériles lors de l'examen des composants sécrétés. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Lors de l'examen des composants à l'intérieur de la cellule, utiliser du PBS (PH 7,2-7,4) pour diluer la suspension cellulaire à une concentration cellulaire d'environ 1 million/ml. Endommager les cellules par des cycles de congélation-décongélation répétés pour laisser sortir les composants internes. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Lorsque des sédiments se produisent pendant le stockage, une centrifugation doit être effectuée à nouveau.

7. Échantillon de tissu : Inciser l'échantillon et peser. Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4). Congeler immédiatement avec de l'azote liquide pour une utilisation ultérieure. Décongeler l'échantillon et le conserver à 2-8 ℃. Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4), puis homogénéiser soigneusement l'échantillon à la main ou à l'aide d'un homogénéisateur. Centrifuger (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Recueillir soigneusement les surnageants. Prélever une aliquote et en conserver une pour examen et congeler les autres pour une utilisation ultérieure.