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Peptide de N-terminalⅠ de Procollagen de rat (PINP) ELISA Kit
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Détails sur le produit:
Conditions de paiement et expédition:
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Description de produit détaillée
Utilisation prévue
Ce kit est employé pour analyser le peptideⅠ de N-terminal de Procollagen (Ⅰ NP de P) dans l'échantillon du sérum du rat, du plasma sanguin et de tout autre liquide biologique relatif.
Principe d'essai
Ce kit emploie l'analyse immunisée enzyme-liée de sorbant (ELISA) basée sur la technologie de sandwich à anticorps de double de biotine pour analyser le peptide de N-terminalⅠ de Procollagen de rat (Ⅰ NP de P). Ajoutez le peptide de N-terminal de Ⅰ de Procollagen (Ⅰ NP de P) aux puits, qui sont enduits avec de l'anticorps monoclonal de peptide de N-terminal de Ⅰ de Procollagen (Ⅰ NP de P) et puis incubent d'un préenduisage. Après que cela, ajoutent d'anti anticorps du NP de Ⅰ de P marqués avec de la biotine pour unir au streptavidin-HRP, qui forme le complexe immun. Remove a défait des enzymes après incubation et lavage. Ajoutez le substrat A et B. Alors la solution tournera bleu et changera en jaune avec l'effet de l'acide. Les nuances de la solution et de la concentration du peptide de N-terminal de Ⅰ de Procollagen de rat (Ⅰ NP de P) sont franchement corrélées.
Matériaux assurés dans le kit d'essai
1 solution du chromogène 0.5ml 7 de la solution étalon (2400ng/ml) un 6ml
2 solution B 6ml de chromogène de la dilution 3ml 8 de norme
3 puits enduit du plat 12 d'ELISA * 8 tubes 9 arrêtent la solution 6ml
4 instruction 1 de Streptavidin-HRP 6ml 10
5 membrane de lavage 2 de plat du joint 20ml 11 du concentré (30X)
6 anti anticorpsⅠ de PNP marqués avec le sac hermétique 1 de la biotine 1ml 12
Matériaux requis mais non assurés
1. 37 lecteur d'enzymes de norme de l'incubateur 2. de ℃
3. Pipettes de précision et eau distillée jetable des astuces 4. de pipette
5. Tubes jetables pour le papier d'absorbant de la dilution 6. d'échantillon
Notes importantes
1. Avant d'ouvrir le kit maintenu à la température de 2-8℃, cela prend au moins 30 minutes pour grimper naturellement jusqu'à la température ambiante. Après interruption du scellé du l'enduit-plat d'ELISA, certaines des rayures utilisées devraient être maintenues dans le sac hermétique.
2.When ajoutant des échantillons, injecteur témoin doit être employé pour chaque fois et devrait également être fréquemment examiné pour assurer sa précision pour éviter l'erreur individuelle.
3. L'instruction doit être strictement suivie tandis que la lecture du lecteur d'ELISA doit être placée comme niveau de déterminer le résultat d'expérience.
les astuces 4.Pipette et la membrane de plat de joint à disposition ne devraient pas être utilisées plus d'une fois afin d'éviter la contamination croisée.
les échantillons 5.All, la concentration de lavage et les gaspillages de chaque sorte devraient être disposés en tant qu'agent infectieux.
les réactifs 6.Other non requis doivent être emballés ou couverts. Des réactifs de différents groupes ne doivent pas être mélangés et devraient être employés avant leurs dates de validité respectives.
7. Le substrat B est sensible à la lumière et ne devrait pas donc être exposé pour s'allumer trop longtemps.
Méthode de lavage
Méthode manuellement de lavage : Lavage à la main : Secouez les liquides dans les puits du plat d'ELISA ; Étendez plusieurs papiers adonnés à la boisson sur le banc d'essai et tapotez dur le plat d'ELISA plusieurs fois vers le bas ; injectez alors au moins 0.35ml de concentration de lavage diluée pour le trempage des minutes 1-2. Répétez ce processus comme nécessaire.
Méthode de lavage automatique : Lavage par le joint automatique de plat : S'il y a un joint automatique de plat, il devrait seulement être employé dans l'essai quand vous êtes tout à fait au courant de ses fonctions.
Précision
précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau rat PNPⅠ ont été examinés 20 fois d'un plat, respectivement.
précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau rat PNPⅠ ont été examinés de 3 plats différents, 8 répliques dans chaque plat.
Cv (%) = SD/meanX100
Intra-analyse : Cv<10>
Inter-analyse : Cv<12>
Conditions de spécimen
1.Samples contenant NaN3 ne doit pas être examiné pendant qu'il empêche l'activité de la peroxydase de raifort sauvage (HRP).
2.After rassemblant l'échantillon, extraction devrait être immédiatement effectué selon des documents connexes. Après extraction, l'expérience devrait être immédiatement aussi bien entreprise. Autrement, gardez l'échantillon à -20℃. Avoid a répété les cycles gel-dégel.
3.Serum : Permettez au sérum de coaguler pendant 10-20 minutes à la température ambiante. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. Quand les sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation devrait être effectuée encore.
plasma 4.Blood : Selon les conditions de la collection témoin, l'EDTA ou le citrate sodique devrait être employé en tant qu'anti coagulation. Ajoutez l'EDTA ou le citrate sodique et mélangez-les pendant 10-20 minutes. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. Quand les sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation devrait être effectuée encore.
5.Urine : Rassemblez par le tube stérile. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. Quand les sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation devrait être effectuée encore. En rassemblant le fluide pleuroperitoneal et le fluide céphalo-rachidien, suivez svp les procédures mentionnées ci-dessus.
surnageant de la culture 6.Cell : Rassemblez par les tubes stériles en examinant pour sécréter des composants. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. En examinant les composants dans la cellule, utilisation PBS (pH 7.2-7.4) de diluer la suspension de cellules à la concentration en cellules d'approximativement 1 million/ml. Cellules de dommages pendant les cycles gel-dégel répétés pour laisser les composants intérieurs. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. Quand les sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation devrait être effectuée encore.
échantillon 7.Tissue : Incisez l'échantillon et pesez. Ajoutez un PBS (pH 7,4). Gel avec de l'azote liquide immédiatement pour une utilisation ultérieure. Dégelez l'échantillon et gardez-le à 2-8℃. Ajoutez un PBS (pH 7,4) et puis homogénéisez l'échantillon complètement à la main ou le homogénisateur. Centrifugeuse (à 2000-3000 t/mn) pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. Partie aliquote et garder un pour l'examen et geler les autres pour une utilisation ultérieure.
Rebecca Yan
Chef de produit
Ltd biotechnologique d'envergure.
Téléphone : + 86(755) 89589611
Téléphone portable : +8618823462100 (WhatsApp)
Web : www.spanbio.com
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