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Peptide de N-terminalⅠ de Procollagen de rat (PINP) ELISA Kit
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Détails sur le produit:
Conditions de paiement et expédition:
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Description de produit détaillée
Utilisation prévue
Ce kit est utilisé pour évaluer le peptide Procollagen I N-terminal ((PINP) dans l' échantillon de sérum, de plasma sanguin et d' autre liquide biologique apparenté du rat.
Principe de l'essai
Ce kit utilise un test d' immunosorbant lié à l' enzyme (ELISA) basé sur la technologie du sandwich à double anticorps de biotine pour évaluer le peptide N-terminal du Procollagen I du rat (PINP).Ajouter le peptide Procollagen I N-terminal ((PINP) aux puits, qui sont pré-enduits d'anticorps monoclonaux de Procollagen I N-terminal peptide ((PINP) et ensuite incubés.qui forme un complexe immunitaire. Retirez les enzymes non liées après l'incubation et le lavage. Ajoutez les substrats A et B. Ensuite, la solution deviendra bleue et jaune sous l'effet de l'acide.Les nuances de la solution et la concentration du peptide N-terminal du procollagen I du rat (PINP) sont positivement corrélées..
Matériaux fournis dans le kit d'essai
1 solution standard ((2400 ng/ ml) 0,5 ml 7 solution de chromogène A 6 ml
2 dilution standard 3 ml 8 solution de chromogène B 6 ml
3 plaques d' ELISA revêtues de 12 puits * 8 tubes 9 Solution à arrêter 6 ml
4 Streptavidine-HRP 6 ml 10 Instructions pour le traitement 1
5 Concentré de lavage (30X) 20 ml
6 Anticorps anti-PINP étiquetés avec de la biotine 1 ml 12 Sac hermétique 1
Matériaux requis mais non fournis
1. incubateur à 37 °C 2. lecteur d'enzymes standard
3- Pipettes de précision et tuyaux jetables 4.
5- Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6.
Notes importantes
1. Avant d'ouvrir le kit conservé à une température de 2-8°C, il faut au moins 30 minutes pour qu'il atteigne naturellement la température ambiante.certaines des bandes utilisées doivent être conservées dans un sac hermétique.
2Lors de l'ajout des échantillons, l'injecteur d'échantillon doit être utilisé à chaque fois et sa précision doit également être vérifiée fréquemment pour éviter les erreurs individuelles.
3L'instruction doit être strictement suivie, tandis que la lecture du lecteur ELISA doit être définie comme norme pour déterminer le résultat de l'expérience.
4Les extrémités de la pipette et la membrane de la plaque d'étanchéité à la main ne doivent pas être utilisées plus d'une fois afin d'éviter une contamination croisée.
5.Tous les échantillons, les concentrations de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés comme agents infectieux.
6Les autres réactifs non nécessaires doivent être emballés ou recouverts. Les réactifs de lots différents ne doivent pas être mélangés et doivent être utilisés avant leur date de validité respective.
7Le substrat B est sensible à la lumière et ne doit donc pas être exposé à la lumière trop longtemps.
Méthode de lavage
Méthode de lavage manuel: lavage à la main: secouer les liquides dans les trous de la plaque d'ELISA; poser plusieurs feuilles de papier sur le banc d'essai et tapoter fortement la plaque d'ELISA plusieurs fois vers le bas;puis injectez au moins 0.35 ml de concentration diluée de lavage pendant 1 à 2 minutes de trempage.
Méthode de lavage automatique: lavage par lave-vaisselle automatique: s'il existe un lave-vaisselle automatique, il ne doit être utilisé que lorsque vous connaissez parfaitement ses fonctions.
Précision
Précision à l'intérieur de l'essai: 3 échantillons présentant des concentrations faibles, moyennes et élevées de PINP chez le rat ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.
Précision entre les essais: 3 échantillons présentant des taux de PINP chez le rat faibles, moyens et élevés ont été testés sur 3 plaques différentes, 8 réplications dans chaque plaque.
CV ((%) = SD/moyenneX100
Le taux de dépistage de la maladie est supérieur à 10%.
Inter-analyse: CV< 12%
Exigences relatives aux échantillons
1Les échantillons contenant du NaN3 ne doivent pas être testés car ils inhibent l'activité de la peroxydase du radis de cheval (HRP).
2Après la collecte de l'échantillon, l'extraction doit être effectuée immédiatement conformément aux documents correspondants. Après l'extraction, l'expérience doit également être réalisée immédiatement.conserver l'échantillon à -20°CÉvitez les cycles de congélation et de dégel répétés.
3.Sérum: laisser le sérum coaguler pendant 10 à 20 minutes à température ambiante. Centrifugez (à 2000 à 3000 tr/min) pendant 20 minutes. Ramassez soigneusement les surnaturants.La centrifugation doit être effectuée à nouveau..
4.Plasma sanguin: conformément aux exigences de la collecte d'échantillons, l'EDTA ou le citrate de sodium doivent être utilisés comme anticoagulants.Centrifugeuse (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutesLorsque des sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.
5.Urine: collecte par tube stérile. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Collectez soigneusement les surnaturants.La centrifugation doit être effectuée à nouveau.. Lors du prélèvement du liquide pleuropéritonéal et du liquide céphalo-rachidien, veuillez suivre les procédures mentionnées ci-dessus.
6.Supernatant de culture cellulaire: collecter par tubes stériles lors de l'examen des composants sécrétés. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Collecter les supernatants avec soin.Lors de l'examen des composants de la cellule, utiliser du PBS (PH 7.2-7.4) pour diluer la suspension cellulaire à une concentration cellulaire d'environ 1 million/ml.Centrifugeuse (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutesLorsque des sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation doit être effectuée à nouveau.
7.Échantillon de tissu: inciser l'échantillon et peser. Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7,4). Congeler immédiatement avec de l'azote liquide pour une utilisation ultérieure. Dégeler l'échantillon et le conserver à 2-8°C.Ajouter une certaine quantité de PBS (PH 7.4) puis homogénéiser l'échantillon à fond à la main ou avec un homogénéiseur. Centrifugez (à 2000-3000 tr/min) pendant environ 20 minutes. Ramassez soigneusement les surnaturants.Aliquot et conserver une pour examen et congeler les autres pour une utilisation ultérieure.
Rebecca Yan est là.
Directeur des affaires internationales
Span Biotech Ltd.
Tél.: +86 ((755) 89589611
Quel est votre numéro de téléphone?
Le site Web: www.spanbio.com www.spanbiotech.com est également disponible.
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Coordonnées
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Personne à contacter: Ms. Anna Lee
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