hormone Follicule-stimulante (FSH) Elisa Kit pour l'usage de Dianostic

hormone Follicule-stimulante (FSH) Elisa Kit pour l'usage de Dianostic

Utilisation prévue
Immunoessai pour la détermination quantitative in vitro de l'hormone follicule-stimulante en sérum humain.

Résumé
FSH (hormone de stimulation de follicule), ainsi que la main gauche (hormone luteinizing), appartient à la famille de gonadotropin. FSH et main gauche règlent et stimuler la croissance et la fonction des gonades (des ovaires et des testicules) synergiquement. Comme la main gauche, TSH et hCG, FSH est une glycoprotéine se composant de deux sous-unités (des chaînes de α- et de ‐ de β). Son poids moléculaire est approximativement 32000 daltons. Chez les femmes, les gonadotropins agissent dans le circuit de réglementation d'ovaire pituitaire de ‐ de ‐ d'hypothalamus de commander le cycle menstruel. (1, 2, 3)
FSH et main gauche sont libérés dans les impulsions des cellules gonadotropic du pituitaire antérieur. Les niveaux des hormones de circulation sont commandés par des hormones stéroïdes par l'intermédiaire du retour négatif à l'hypothalamus. Dans les ovaires FSH, ainsi que la main gauche, stimule la croissance et la maturation de la follicule et par conséquent aussi de la biosynthèse des oestrogènes dans les follicules. Le niveau de FSH montre une crête au mi-cycle, bien que ceci moins soit identifié que par la main gauche. En raison des changements de fonction ovarienne et de sécrétion réduite d'oestrogène, les concentrations élevées de FSH se produisent pendant la ménopause. (3) chez les hommes, FSH sert à induire le spermatogoniumdevelopment. La détermination de la concentration de FSH est employée dans l'élucidation des dysfonctionnements dans le système pituitaire de gonades de ‐ de ‐ d'hypothalamus. La détermination de FSH en même temps que la main gauche est utilisée pour les indications suivantes : maladies congénitales avec des aberrations de chromosome, des ovaires polycystic (PCO), l'aménorrhée (causes), et le syndrome ménopausique. Les niveaux diminués de gonadotropin chez les hommes se produisent dans l'azoospermie. (1, 2, 3, 4, 5)

Principe d'essai
Principe de sandwich. Durée totale d'analyse : 80 minutes.
• L'échantillon, les anti-FSH microwells enduits et l'enzyme marquée anti-FSH sont combinés.
• Pendant l'incubation, on laisse FSH présente dans l'échantillon réagir simultanément avec des deux anticorps, ayant pour résultat les molécules de FSH étant serrées entre la phase solide et les anticorps enzyme-liés.
• Après le lavage, un complexe est produit entre la phase solide, le FSH dans l'échantillon et les anticorps enzyme-liés par des réactions immunologiques.
• Les solutionis de substrat se sont alors ajoutés et ont catalysé par ce complexe, ayant pour résultat une réaction chromogène. La réaction chromogène en résultant est mesurée comme absorbance.
• L'absorbance est proportionnelle à la quantité de FSH dans l'échantillon.

Réactifs
Matériaux fournis
• Microplate enduit, 8 X12 bandes, 96 puits, enduits d'un préenduisage avec anti-FSH monoclonal de souris.
• Calibreurs, 6 fioles, 1 ml chacun, prêtes à employer ; Concentrations : 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) et 200 (F) mIU/mL.
• Le conjugué d'enzymes, 1 fiole, 11 ml de HRP (peroxydase de raifort) a marqué la souris anti-FSH monoclonal dans le tampon Tris-NaCl contenant BSA (albumine de sérum de boeuf). Contient 0,1% agents de conservation de ProClin300®.
• Substrat, 1 fiole, 11ml, prêt à employer, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Arrêtez la solution, 1 fiole, 6,0 ml de 1 mole/l d'acide sulfurique.
• Concentré de solution de lavage, 1 fiole, 25 ml (40X s'est concentré), solution de lavage de PBS-tween.
• IFU, 1 copie.
• Couvercle de plat : 1 morceau.

Matériaux exigés (mais non fourni)
• Lecteur de Microplate avec la capacité absorbante de la longueur d'onde 450nm et 620nm.
• Joint de Microplate.
• Incubateur.
• Dispositif trembleur de plat.
• Micropipettes et micropipettes multicanales livrant 50μl avec une précision de meilleur que 1,5%.
• Papier absorbant.
• Eau distillée

Précautions et avertissements
• Pour l'usage diagnostique in vitro seulement. Pour à usage professionnel seulement.
• Tous les produits qui contiennent le sérum ou le plasma humain se sont avérés non-réactifs pour HBsAg, HCV et HIVI/II. Mais tous les produits devraient être élevés en tant que biohazards potentiels en service et pour la disposition.
• Mélangez l'échantillon dans les puits complètement par la secousse et éliminez les bulles.
• Conduisez l'analyse à partir de mauvaises conditions ambiantes. par exemple air ambiant contenant le gaz corrosif de forte concentration tel que l'acide d'hypochlorite de sodium, alcalin, l'acétaldéhyde et ainsi de suite, ou contenant la poussière.
• Lavez les puits complètement. Chaque puits doit être entièrement injecté avec la solution de lavage. La force de l'injection, cependant, n'est pas censée être trop intense pour éviter le débordement. Dans chaque cycle de lavage, séchez les liquides dans chaque puits. Frappez le microplate sur le papier absorbant pour enlever les gouttelettes d'eau résiduelles. On lui recommande de laver le microplate avec un joint automatisé de bande de microplate.
• Le manque d'enlever adhérer la solution en juste proportion dans les étapes de lavage d'aspiration ou de décantation peut avoir comme conséquence la reproduction pauvre et les faux résultats.
• N'employez pas les réactifs au delà de la date d'échéance marquée.
• Ne mélangez pas ou n'employez pas les composants des kits avec différents codes en lots.
• Si plus d'un plat est utilisé, on lui recommande de répéter la courbe d'étalonnage.
• Il est important que la période de la réaction dans chaque puits soit jugée constante pour réaliser des résultats reproductibles.
• Assurez-vous que le fond du plat est propre et sec.
• Assurez-vous qu'aucune bulle n'est présente sur la surface du liquide avant de lire le plat.
• Thesubstrate et solution d'arrêt devraient être ajoutés dans le même ordre pour éliminer n'importe quand la déviation pendant la réaction.

Stockage
• Magasin à 2-8℃.
• Placez les puits inutilisés dans la poche déjouée en aluminium zip-lock et retourner au °C 2-8, dans quelles conditions les puits resteront stables pendant 2 mois, ou jusqu'à la date d'échéance marquée, celui qui est plus tôt.
• Le joint et les calibreurs inutilisés de retour au °C 2-8, sous lequel des conditions la stabilité seront maintenues pour 1 mois, pour un plus long usage, magasin ont ouvert les calibreurs dans les parties aliquotes et le gel à -20 °C. Évitez les cycles gel-dégel multiples.
• Scellez et renvoyez tous les autres réactifs inutilisés au °C 2-8, sous lequel des conditions la stabilité seront maintenues pendant 2 mois, ou jusqu'à la date d'échéance marquée, celui qui est plus tôt.