Insuline humaine (Institut central des statistiques) ELISA Kit

Insuline humaine (Institut central des statistiques) ELISA Kit

Types témoin : Sérum, plasma sanguin, salive, urine, et tout autre liquide relatif de tissu.
 

Utilisation prévue
Ce kit est employé pour analyser l'insuline (Institut central des statistiques) dans l'échantillon du sérum de l'humain, du plasma sanguin, et de tout autre liquide relatif de tissu.
 

Principe d'essai
Le kit emploie une analyse d'immunosorbant enzyme-liée par sandwich de double-anticorps (ELISA) pour analyser le niveau de l'insuline humaine (Institut central des statistiques) dans les échantillons. Ajoutez l'insuline (Institut central des statistiques) à l'enzyme d'anticorps monoclonal bien qui est enduite d'un préenduisage avec de l'anticorps monoclonal humain de l'insuline (Institut central des statistiques), incubation ; puis, ajoutez les anticorps de l'insuline (Institut central des statistiques) marqués avec de la biotine, et combinés avec Streptavidin-HRP pour former le complexe immun ; effectuez alors l'incubation et le lavage encore pour éliminer l'enzyme non liée. Ajoutez alors la solution A, B, la couleur de chromogène des changements liquides dans le bleu, et à l'effet de l'acide, la couleur devient finalement jaune. Le chroma de couleur et la concentration de l'insuline humaine de substance (Institut central des statistiques) de l'échantillon ont été franchement corrélés.
Matériaux assurés dans le kit d'essai
 

Matériaux requis mais non assurés
1. incubateur de 37 ℃                              2. lecteur d'enzymes de norme
3. pipettes de précision et astuces jetables de pipette      4. eau distillée
5. tubes jetables pour la dilution d'échantillon             6. papier d'absorbant
 

Notes importantes
1. Beening sorti de l'environnement 2-8℃, le kit devrait être équilibré 30 minutes dans la température ambiante emploient alors. Si les plats enduits de l'enzyme n'ont pas été utilisés après ouvert, les plats restants devraient être stockés dans le sac scellé.
2. Pour chaque étape, ajoutez l'échantillon avec l'injecteur témoin qui devrait être calibré fréquemment, afin d'éviter la tolérance expérimentale inutile.
3. il opération sera accord effectué aux instructions strictement. Et des résultats d'essai doivent être basés sur les lectures du lecteur d'enzymes.
4. afin d'éviter la contamination transversale, on l'interdit de réutiliser la membrane de plat de tête et de joint d'aspiration dans des vos mains.
5. Tout l'échantillons, tampon de lavage et chaque genre de rejet devraient selon le processus matériel contagieux.
6. Les agents oisifs seront mis ou couverts. N'employez pas le réactif avec différents groupes. Et employez-les avant date expirée.
7. Le substrat B est sensible à la lumière. On interdit l'exposition prolongée à la lumière.
 

Méthode de lavage
Méthode manuellement de lavage : secouez loin restent liquides dans les plats d'enzymes ; placez quelques papiers adonnés à la boisson sur le banc d'essai, et agitez les plats sur le à l'envers fortement. Injectez au moins la solution de lavage de l'après-dilution 0.35ml dans le puits, et marinez 1~2 minutes. Répétez ce processus selon vos conditions.
Méthode de lavage automatique : s'il y a machine à laver automatique, elle devrait seulement être employée dans l'essai quand vous êtes tout à fait au courant de sa fonction et représentation.
 

Précision
précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau Institut central des statistiques humain ont été examinés 20 fois d'un plat, respectivement.
 précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau Institut central des statistiques humain ont été examinés de 3 plats différents, 8 répliques dans chaque plat.
 Cv (%) = SD/meanX100
Intra-analyse : Inter-analyse<10> de cv : Cv<12>
 

Conditions de spécimen

1. Ne peut pas détecter l'échantillon qui contiennent NaN3, parce que NaN3 empêche HRP actif.
2. extrayez dès que possible après collection de spécimen, et selon la littérature appropriée, et devriez être expérience dès que possible après l'extraction. Si elle ne peut pas, le spécimen peut être maintenu dans le ℃ -20 pour préserver, Avoid a répété les cycles gel-dégel.
3. la coagulation de sérum à la température ambiante 10-20 minutes, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
4.plasma-use a adapté à l'EDTA ou le plasma de citrate comme anticoagulant, mélange 10-20 minutes, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
5. Urine-rassemblez pour poursuivre un conteneur stérile, la centrifugation 20 que la minute à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore. L'ofHydrothorax d'opération et la référence de fluide céphalo-rachidien à elle.
la culture 6.cell surnageant-détecter les composants sécréteurs, se rassembler pour poursuivre un conteneur stérile, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 pour enlever le surnageant, détecter la composition des cellules, suspension de cellules de Dilut avec PBS (PH7.2-7.4), concentration en cellules a atteint 1 million/ml, cycles gel-dégel répétés, cellules de dommages et la libération des composants intracellulaires, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
7.Tissue prélève après coupure des échantillons, vérifie le poids, ajoute PBS (PH7.2-7.4), rapidement congelé avec de l'azote liquide, maintient des échantillons à 2-8℃ après fonte, ajoute PBS (PH7.4), homogénéisé à la main ou les broyeurs, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant.