Ce kit est utilisé pour évaluer l'anticorps anti-ASMA dans l'échantillon de sérum humain, de plasma sanguin et d'autres liquides tissulaires connexes.
Principe de l'essai
Le kit utilise un test d'immunosorbent lié à l'enzyme par sandwich à double anticorps (ELISA) pour évaluer le niveau d'anticorps anti-musculaire lisse humain (ASMA) dans les échantillons.Ajouter l'anticorps anti-muscle lisse (ASMA) à l'anticorps monoclonal Enzyme well qui est pré-enduit avec l'anticorps anti-muscle lisse humain (ASMA), l' incubation; ensuite, ajouter des anticorps anti-ASMA marqués avec de la biotine, et combinés avec Streptavidin-HRP pour former un complexe immunitaire;Ensuite, procéder à l'incubation et à un nouveau lavage pour éliminer l'enzyme non combinée.Puis ajouter la solution de chromogène A, B, la couleur du liquide change en bleu, et à l'effet de l'acide, la couleur finit par devenir jaune.Le chromat de couleur et la concentration de l'anticorps anti-musculaire lisse de la substance humaine (ASMA) de l'échantillon ont été positivement corrélés..
1. 37 °Cincubateur 2.Lecteur d'enzymes standard 3.Pipettes de précision et boutons de pipette jetables 4.Eau distillée 5.Tubes jetables pour la dilution des échantillons 6.Papier absorbant
Notes importantes
1Si les plaques enduites d'Enzyme n'ont pas été utilisées après ouverture, elles doivent être conservées à température ambiante pendant 30 minutes.les autres plaques doivent être conservées dans un sac scellé.2Pour chaque étape, ajouter l'échantillon avec l'injecteur d'échantillon qui doit être calibré fréquemment, afin d'éviter des tolérances expérimentales inutiles.3. l'opération doit être effectuée selon les instructions strictement et les résultats des essais doivent être basés sur les relevés du lecteur d'enzymes.4Pour éviter la contamination croisée, il est interdit de réutiliser la tête d'aspiration et la membrane de la plaque d'étanchéité dans vos mains.5Tous les échantillons, les tampons de lavage et chaque type de déchets doivent être selon le procédé de traitement des matières infectieuses.6. Les réactifs inactifs doivent être emballés ou recouverts. Ne pas utiliser le réactif avec des lots différents. Et les utiliser avant la date de péremption.7Le substrat B est sensible à la lumière, une exposition prolongée à la lumière est interdite.
Méthode de lavage
Méthode de lavage manuelle: secouer le liquide restant dans les plaques enzymatiques; placer des feuilles de papier sur le lit d'essai et battre fortement les plaques à l'envers.35 ml de solution de lavage après dilution dans le puits, et mariner 1 à 2 minutes. Répétez ce processus selon vos besoins.Méthode de lavage automatique:s'il existe une machine à laver automatique,Il ne doit être utilisé dans le test que lorsque vous connaissez parfaitement sa fonction et ses performances..
Précision
Précision à l'intérieur de l'essai: 3 échantillons présentant des taux de HumanASMA bas, moyens et élevés ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.3 échantillons avec faible, le niveau moyen et élevé de HumanASMA a été testé sur 3 plaques différentes, 8 réplications dans chaque plaque.
Exigences relatives aux échantillons
1On peut détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité du HRP.2. extraire le plus tôt possible après la collecte des spécimens et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté le plus tôt possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles répétés de congélation et de décongélation.3- coagulation sérique à température ambiante de 10 à 20 min, centrifugation de 20 min à une vitesse de 2000 à 3000 tr/min, élimination du surnaturant, si des précipitations apparaissent, centrifugation à nouveau.4- EDTA ou citrate plasmatique utilisé dans le plasma comme anticoagulant, mélangé pendant 10 à 20 min, centrifugé pendant 20 min à une vitesse de 2 000 à 3 000 tr/min.5La collecte de l'urine est effectuée dans un récipient stérile, centrifugée pendant 20 minutes à une vitesse de 2000 à 3000 tr/min.L'opération de l'hydrothorax et du liquide céphalo-rachidien.6Les cultures cellulaires, détectent les composants sécrétoires, les recueillent dans un récipient stérile, les centrifugent pendant 20 minutes à une vitesse de 2000 à 3000 tr/min.Suspension de cellule diluée avec PBS ((PH7).2-7.4), la concentration cellulaire atteint 1 million/ml, cycles de congélation et de dégel répétés, cellules endommagées et libération de composants intracellulaires, centrifugation 20 min à une vitesse de 2000-3000 tr/min.éliminer le surnaturantSi des précipitations apparaissent, centrifugez à nouveau.7.échantillons de tissus- Après coupure des échantillons, vérifier le poids, ajouter du PBS (PH7.2-7.4), congeler rapidement avec de l'azote liquide, maintenir les échantillons à 2-8°C après fusion, ajouter du PBS (PH7.4), homogénéiser à la main ou au broyeur,Centrifugation 20 min à une vitesse de 2000 à 3000 r.p.m. supprimez le supernatant.
Rebecca Yan est là.
Directeur des affaires internationales Span Biotech Ltd. Tél.: +86 ((755) 89589611 Quel est votre numéro de téléphone? Le site Web: www.spanbio.com www.spanbiotech.com est également disponible.